Details

Title: Изучение невирионной рнк-полимеразы, кодируемой бактериофагом phikz: бакалаврская работа: 16.03.01
Creators: Корешова Алевтина Андреевна
Scientific adviser: Якунина Мария Вячеславовна
Organization: Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого. Институт физики, нанотехнологий и телекоммуникаций
Imprint: Санкт-Петербург, 2017
Collection: Выпускные квалификационные работы; Общая коллекция
Subjects: Бактерии; бактериофаги; неканонические рнк-полимеразы; инициация транскрипции; коэкспрессионные системы
Document type: Bachelor graduation qualification work
File type: PDF
Language: Russian
Level of education: Bachelor
Speciality code (FGOS): 16.03.01
Speciality group (FGOS): 160000 - Физико-технические науки и технологии
DOI: 10.18720/SPBPU/2/v17-2444
Rights: Доступ по паролю из сети Интернет (чтение, печать, копирование)
Record key: RU\SPSTU\edoc\40051

Allowed Actions:

Action 'Read' will be available if you login or access site from another network Action 'Download' will be available if you login or access site from another network

Group: Anonymous

Network: Internet

Annotation

Работа посвящена одной из двух неканонических ДНК-зависимых РНК-полимераз (РНКП), кодируемых гигантским бактериофагом phiKZ. Была создана коэкспрессионная система для наработки больших количеств рекомбинантной фаговой РНКП в клетках Escherihia coli. Система состоит из совместимых плазмид, на одной из которых закодированы 4 фаговые субъединицы, гомологичные фрагментам бактериальной РНКП, причем одна из плазмид несет аффинный «хвост», а на второй закодирована пятая фаговая субъединица с неизвестной функцией. Также была получена плазмида для экспрессии пятой субъединицы с аффинным «хвостом». Были подобраны оптимальные условия экспрессии и очистки рекомбинантных белков. Каталитическая активность полученных белковых комплексов и их способность связывать ДНК были проанализированы в сравнении с нативным ферментом, полученным ранее из культуры клеток Pseudomonas aeruginosa, инфицированных фагом phiKZ. Выяснилось, что пятисубъединичный комплекс ведет себя аналогично нативному ферменту, в то время как четырехсубъединичный комплекс испытывает затруднения при сборке в клетках E.coli, не узнает промотор и не способен удлинять РНК-продукт. Исходя из полученных данных, мы высказали предположение, что пятая субъединица имеет важное значение для сборки функционального комплекса.

Document access rights

Network User group Action
ILC SPbPU Local Network All Read Print Download
Internet Authorized users SPbPU Read Print Download
-> Internet Anonymous

Usage statistics

stat Access count: 423
Last 30 days: 0
Detailed usage statistics