В данной работе исследовано влияние соеднинений лефлуномида, терифлуномила и рофлумиласта на депо-управляемый вход Ca2+ в клеточной модели болезни Альцгеймера. В качестве модели болезни Альцгеймера были использованы клетки линии SH-SY5Y, трансфицированные конструкциями, несущими ген PS1 дикого типа или его мутантную форму PS1-M146V . В данной модели наблюдается гиперактивность кальциевых сенсоров STIM2, приводящая к переполнению внутриклеточных кальциевых депо ЭР. Повышенная концентрация кальция депо приводит к снижению индуцированного депо-управляемого входа кальция. 24-х часовая инкубация клеток, экспрессирующих ген PS1-M146V , с лефлуномидом и рофлумиластом приводила к восстановлению депо-управляемого входа Ca2+.

Leflunomide, teriflunomide and roflumilast were recently described as possible store-operated calcium channel inhibitors. Store-operated calcium entry and calcium homestasis are disrupted in SH-SY5Y cells with mutant PS1-M146V, associated with Alzheimer’s disease. Hyperactivity of STIM2 calcium sensors leads to basal calcium entry, calcium store overload and, subsequently, reduce in store-operated calcium entry. 24-hour incubation with leflunomide and roflumilast normalized store-operated calcium entry in SH-SY5Y cells, bearing mutant PS1-M146V, comparing to wild-type PS1.

• 1. Список сокращений
• 2. Введение
• 3. Литературный обзор
  • 3.1. Нейродегенеративные болезни. Болезнь Альцгеймера и её аспекты.
    • 3.1.1. Болезнь Альцгеймера
    • 3.1.2. Патофизиология БА
    • 3.1.3. Генетика болезни Альцгеймера
    • 3.1.4. Ген APP
    • 3.1.5. Гены PSEN1 и PSEN2
  • 3.2. Амилоидная гипотеза БА
  • 3.3. Кальциевая гипотеза БА
  • 3.4. Гомеостаз кальция в клетке
  • 3.5. Депо-управляемый вход Ca2+
    • 3.5.1. Кальциевые сенсоры STIM
    • 3.5.2. Белки Orai
    • 3.5.3. TRPC
  • 3.6. Кальциевый гомеостаз при болезни Альцгеймера.
• 4. Материалы и методы
  • 4.1. Ведение клеточных культур
  • 4.2. Трансфицирование клеток
  • 4.3. Лизирование клеток
  • 4.4. Электрофорез в ПААГ и вестерн-блоттинг
  • 4.6. Статистическая обработка данных
• 5. Результаты и их обсуждение
• 6. Заключение
• 7. Выводы
• 8. Список литературы