В работе рассмотрены несколько способов модификации МАЛДИ мишени структурами на основе монослоев стеаратов металлов. Впервые получены коллапсированные монослои стеаратов металлов непосредственно на поверхности мишени МАЛДИ. Показана возможность использования структур на основе монослоев стеаратов металлов, сформированных на МАЛДИ мишени, в качестве сорбентов для проведения металл-аффинной экстракции аддуктов сывороточного альбумина человека с фосфорорганическим соединением. Полученные сорбенты на основе монослоев стеаратов металлов охарактеризованы набором физико-химических методов.

In the given work several methods of modification of MALDI target with structures based on monolayers of metal stearates are considered. For the first time, collapsed monolayers of metal stearates are obtained directly on the surface of the MALDI target. The possibility of using monolayers of metal stearates formed on the MALDI target as sorbents for metal-affinity extraction of protein adducts with an organophosphorus compound is shown. The obtained sorbents based on monolayers of metal stearates are characterized by a set of physicochemical methods.

• ВВЕДЕНИЕ
• ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
  • 1.1. Металл-аффинная хроматография
  • 1.2. Фосфопротеомика в МАХ
  • 1.3. Металл-аффинные сорбенты
  • 1.4. МАЛДИ масс-спектрометрия
  • 1.5. Нанесение покрытий на мишень
• ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
  • 2.1.Материалы
  • 2.2.Методы
    • 2.2.1. Получение монослоев стеарата лантана в ленгмюровской ванне
      • 2.2.1.1. Получение монослоев FLa в ленгмюровской ванне для элементного анализа
      • 2.2.1.2. Перенос на подложку монослоев на установке ЛенгмюраБлоджетт.
      • 2.2.1.3. Получение и перенос на мишень коллапсированных монослоев FLa в ванне Ленгмюра
    • 2.2.2. Сканирующая электронная микроскопия коллапсированных пленок FLa
    • 2.2.3. Определение сорбционной способности FLa по казеину быка методом атомно-силовой микроскопии
    • 2.2.4. Получение монослоев FLa на мишени МАЛДИ
    • 2.2.5. Получение монослоев FLa на мишени МАЛДИ из водных растворов соли лантана с различными концентрациями
    • 2.2.6. Проведение металл-аффинной экстракции на мишени МАЛДИ
      • 2.2.6.1. Металл-аффинная экстракция на коллапсированных монослоях FLa
      • 2.2.6.2. Металл-аффинная экстракция на монослоях FLa, сформированных на мишени
    • 2.2.7. Определение структурного звена монослоев FLa, сформированных на мишени МАЛДИ
    • 2.2.8. МАЛДИ масс-спектрометрический анализ
    • 2.2.9. Получение пептических гидролизатов сывороточного альбумина
    • 2.2.10. Приготовление раствора образца
    • 2.2.11. Определение сорбционной способности сорбента по аддукту белка с ФОС
    • 2.2.12. Приготовление серии растворов образца с различным соотношением фосфонилированного к нефосфонилированному пептиду
    • 2.2.13. Анализ монослоев FLa методом CHN-анализа
• ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
  • 3.1. Получение монослоев FLa в ванне Ленгмюра
  • 3.2. Исследование методом атомно-силовой микроскопии с поверхности пленок FLa сорбции и десорбции казеина быка
  • 3.3. Перенос коллапсированных монослоев FLa на мишень МАЛДИ
  • 3.4. Формирование монослоев Ленгмюра на мишени МАЛДИ
  • 3.5. Определение структурного звена монослоев, сформированных на мишени МАЛДИ
  • 3.6. Подбор концентрации соли лантана для получения монослоев на мишени МАЛДИ
  • 3.7. Определение условий сорбции на мишени МАЛДИ
  • 3.8. Апробация металл-аффинного анализа аддукта белка с ФОС с использованием стеаратов алюминия, галлия, индия, хрома (III), железа (III), кобальта (II), церия (III), европия (II) и иттербия.
• ЗАКЛЮЧЕНИЕ