Таблица | Карточка | RUSMARC | |
Разрешенные действия: –
Действие 'Прочитать' будет доступно, если вы выполните вход в систему или будете работать с сайтом на компьютере в другой сети
Действие 'Загрузить' будет доступно, если вы выполните вход в систему или будете работать с сайтом на компьютере в другой сети
Группа: Анонимные пользователи Сеть: Интернет |
Аннотация
Никотинамид аденин динуклеотид (NAD) - участник важнейших метаболических и сигнальных процессов в клетках человека. NAD является кофактором в окислительно-восстановительных реакциях и выступает в роли субстрата для нескольких семейств регуляторных ферментов. Данные сигнальные процессы принимают участие в регуляции экспрессии генов, прохождения по клеточному циклу, репарации ДНК и апоптоза. Регуляция NAD-зависимых метаболических и сигнальных процессов зависит от способности клетки поддерживать определенный уровень данного динуклеотида. Основным механизмом контроля количества NAD в клетках человека является его биосинтез. В клетках бактерий и простейших эукариот, помимо биосинтеза, описан механизм регуляции уровня NAD путем его расщепления до мононуклеотидов NMN и AMP пирофосфатазами семейства Nudix YjaD и NdxA. Белки NUDT12 и NUDT13 характеризуются наибольшей гомологией к Nudix пирофосфатазам YjaD и NdxA. В данном проекте описываются начальные этапы работы, целью которой является проверка гипотезы о том, что белки NUDT12 и NUDT13 могут регулировать уровень NAD в клетках человека. Нами были созданы векторы для экспрессии His-tag-слитых белков NUDT12 и NUDT13 в бактериальных клетках. Далее была проведена трансформация клеток E. coli (Rosetta) полученными векторами и подобраны условия для эффективной сверхэкспрессии рекомбинантных белков. Уровень экспрессии и размер сверхэкспрессированных белков оценивали при помощи разделения в денатурирующем полиакриламидном геле. Также нами были созданы векторы для экспрессии FLAG-слитых белков NUDT12 и NUDT13 в клетках человека. Белки FLAG-NUDT12 и FLAG-NUDT13 были сверхэкспрессированы в клетках HEK293 после их временной трансфекции соответствующими векторами. После этого мы оценивали уровень экспрессии и размер сверхэкспрессированных белков при помощи метода иммуноблоттинга, с использованием специфических антител к FLAG-пептиду.
Права на использование объекта хранения
Место доступа | Группа пользователей | Действие | ||||
---|---|---|---|---|---|---|
Локальная сеть ИБК СПбПУ | Все | |||||
Интернет | Авторизованные пользователи СПбПУ | |||||
Интернет | Анонимные пользователи |
Статистика использования
Количество обращений: 364
За последние 30 дней: 0 Подробная статистика |