Детальная информация
Название | Биофизические основы работы с белками. Протоколы: учебное пособие |
---|---|
Авторы | Забродская Я. А. ; Шалджян Арам Арутюнович ; Егоров Владимир Владимирович ; Коневега А. Л. |
Организация | Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого |
Выходные сведения | Санкт-Петербург, 2020 |
Коллекция | Учебная и учебно-методическая литература ; Общая коллекция |
Тематика | Биофизика ; Белки |
УДК | 577.3(075.8) |
Тип документа | Учебник |
Тип файла | |
Язык | Русский |
Код специальности ФГОС | 16.04.01 ; 12.04.01 ; 03.06.01 |
Группа специальностей ФГОС | 160000 - Физико-технические науки и технологии ; 120000 - Фотоника, приборостроение, оптические и биотехнические системы и технологии ; 030000 - Физика и астрономия |
DOI | 10.18720/SPBPU/2/s20-95 |
Права доступа | Свободный доступ из сети Интернет (чтение, печать, копирование) |
Ключ записи | RU\SPSTU\edoc\62396 |
Дата создания записи | 30.04.2020 |
Данное учебное пособие содержит информацию о наиболее распространённых методах, используемых в биохимической и биофизической лаборатории при исследовании белковых молекул. Помимо физико-химических основ методов учебное пособие содержит подробные протоколы проведения экспериментов, приготовления буферных растворов и выполнения всех необходимых манипуляций, а также отмечены моменты, на которые следует обратить особое внимание в процессе работы. Рассмотрены такие методы, как электрофоретическое разделение белков, определение концентрации белков, вестерн блоттинг, иммуноферментный анализ, методы специфического выделения антигенов из растворов, также приведены некоторые методики подготовки белков к масс-спектрометрической идентификации. Такое пособие будет полезно не только студентам в рамках теоретического изучения методик работы с белками, но также и молодым научным сотрудникам и аспирантам, непосредственно проводящим эксперименты, для понимания базовых основ используемых методик, что позволяет применять их на практике максимально эффективно.
- ОГЛАВЛЕНИЕ
- ВВЕДЕНИЕ
- РАЗДЕЛ 1. ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОЕ РАЗДЕЛЕНИЕ БЕЛКОВ В ПОЛИАКРИЛАМИДНОМ ГЕЛЕ
- § 1.1 ЭФ в ПААГ в денатурирующих условиях в присутствии додецилсульфата натрия
- § 1.2 Двумерный ЭФ в ПААГ
- § 1.3 Нативный синий
- § 1.4 Трициновый ЭФ в ПААГ
- РАЗДЕЛ 2. ОКРАШИВАНИЕ ГЕЛЕЙ ПОСЛЕ ЭФ В ПААГ
- §2.1 Окрашивание серебром
- § 2.2 Окрашивание коллоидным раствором Кумасси G250
- § 2.3 Окрашивание Кумасси R250 (система «уксус-этанол»)
- § 2.4 Экспресс-окрашивание Кумасси G250
- РАЗДЕЛ 3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ БЕЛКОВ
- § 3.1 Метод Лоури в модификации Сандермана и Стромингера
- § 3.2 Метод Брэдфорда
- § 3.3 По поглощению на длине волны 280 нм
- РАЗДЕЛ 4. ИММУНОДЕТЕКЦИЯ
- § 4.1 Вестерн блоттинг
- §4.3 Дот-блоттинг
- §4.4 Иммунодетекция антигена на мембране
- §4.5 Хемилюминесценция (реакция люминол-кумаровая кислота)
- §4.6 Окрашивание при помощи DAB
- § 4.7 Иммуноферментный анализ
- § 4.8 Аффинная хроматография в объёме
- § 4.9 Иммунопреципитация
- РАЗДЕЛ 5. ПРОБОПОДГОТОВКА К МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ
- § 5.1 Ферментативный гидролиз в геле трипсином
- § 5.2 Ферментативный гидролиз в растворе трипсином
- § 5.3 Обессаливание на ZipTip
- § 5.4 Приготовление матриц для MALDI масс-спектрометрии
- § 5.5 Получение изотопно меченых стандартов
- ПРИЛОЖЕНИЯ
- Приложение А. Лизирование клеток
- Приложение Б. Физические Свойства Радиоизотопов
- Приложение В. Физические характеристики нуклеозидтрифосфатов и дезоксинуклеотидтрифосфатов
- СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Количество обращений: 1366
За последние 30 дней: 131