В работе исследуется структурная организация рекомбинантного s-1 рецептора и его конформационные модификации под действием лигандов. В ходе работы создана система экспрессии рекомбинантного s-1 рецептора в бактериях E.coli, оптимизирована схема выделения и очистки белка. Для оценки функциональной активности s-1 рецептора разработан метод качественной аффинной хроматографии (pull-down assay). Показано, что рекомбинантный s-1 рецептор человека имеет олигомерную организацию в бактериальных мембранах, но в процессе очистки происходит диссоциация олигомеров на мономеры. Связывание лиганда стабилизирует олигомерные комплексы рекомбинантного s-1 рецептора и, по-видимому, вызывает олигомеризацию.

In this paper the structural organization of recombinant s-1 receptor and its conformational changes in response to ligand binding are investigated. Human s-1 receptor gene was cloned and recombinant s-1 receptor was overexpressed in E.coli. The scheme of protein extraction and purification was optimized. Qualitative affinity chromatography method (pull-down assay) was developed to analyze the ligand binding activity of s-1 receptor. It was revealed, that recombinant s-1 receptor exists in oligomeric form in bacterial membranes,but the receptor oligomers are dissociated into monomers during the purification procedure. The ligand binding stabilizes oligomeric forms of s-1 receptor and, presumably, causes self-association of receptor monomeric subunits and their conversion to high molecular mass assemblies.