Table | Card | RUSMARC | |
Allowed Actions: –
Action 'Read' will be available if you login or access site from another network
Action 'Download' will be available if you login or access site from another network
Group: Anonymous Network: Internet |
Annotation
Работа посвящена одной из двух неканонических ДНК-зависимых РНК-полимераз (РНКП), кодируемых гигантским бактериофагом phiKZ. Была создана коэкспрессионная система для наработки больших количеств рекомбинантной фаговой РНКП в клетках Escherihia coli. Система состоит из совместимых плазмид, на одной из которых закодированы 4 фаговые субъединицы, гомологичные фрагментам бактериальной РНКП, причем одна из плазмид несет аффинный «хвост», а на второй закодирована пятая фаговая субъединица с неизвестной функцией. Также была получена плазмида для экспрессии пятой субъединицы с аффинным «хвостом». Были подобраны оптимальные условия экспрессии и очистки рекомбинантных белков. Каталитическая активность полученных белковых комплексов и их способность связывать ДНК были проанализированы в сравнении с нативным ферментом, полученным ранее из культуры клеток Pseudomonas aeruginosa, инфицированных фагом phiKZ. Выяснилось, что пятисубъединичный комплекс ведет себя аналогично нативному ферменту, в то время как четырехсубъединичный комплекс испытывает затруднения при сборке в клетках E.coli, не узнает промотор и не способен удлинять РНК-продукт. Исходя из полученных данных, мы высказали предположение, что пятая субъединица имеет важное значение для сборки функционального комплекса.
Document access rights
Network | User group | Action | ||||
---|---|---|---|---|---|---|
ILC SPbPU Local Network | All | |||||
Internet | Authorized users SPbPU | |||||
Internet | Anonymous |
Usage statistics
Access count: 423
Last 30 days: 0 Detailed usage statistics |