В данной работе произведено исследование эндоцитоза рЭФР, стимулированного ЭФР в низкой (2нМ) и близкой к насыщающей (10нМ) концентрациях. Приведены классификации стволовых клеток, даны общие понятия об эМСК, эндоцитозе рЭФР и основных сигнальных путях от рЭФР. Исследованы динамика активации основных сигнальных путей от рЭФР (МАР-киназного (ERK1/2)- и АКТ- каскадов) и динамика эндоцитоза рЭФР, стимулированного ЭФР в концентрациях 2 нМ и 10 нМ. Произведены сравнение динамики активации в эМСК основных сигнальных каскадов от рЭФР и сравнение динамики эндоцитоза при стимуляции клеток низкой и повышенной концентрациями лиганда.

• СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
• ВВЕДЕНИЕ
• ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
  • 1.1. Понятие о стволовых клетках и их классификация
  • 1.2. Общая характеристика мезенхимных стволовых клеток
  • 1.3. Эндометриальные мезенхимные стволовые клетки (эМСК)
  • 1.4. Получение эндометриальных мезенхимных стволовых клеток
  • 1.5. Внутриклеточный везикулярный транспорт
  • 1.6. Регуляция эндоцитоза
    • 1.6.1. Rab-белки
    • 1.6.2. Основные эффекторы Rab5
    • 1.6.3. Система NSF-SNAP-SNARE
  • 1.7. Характеристика эндоцитозного пути
  • 1.8. Общие сведения об эпидермальном факторе роста (ЭФР) и его рецепторе
  • 1.9. Эндоцитоз рецептора ЭФР и основные сигнальные пути от него
• ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
  • 2.1. Клеточные культуры
  • 2.2. Стимуляция эндоцитоза
  • 2.3. SDS-электрофорез и иммуноблотинг
  • 2.4. Иммунофлуоресцентный анализ
  • 2.5. Лазерная сканирующая конфокальная микроскопия
  • 2.6. Анализ и обработка изображений
  • 2.7. Статистическая обработка данных
• ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ
  • 3.1. Исследование динамики эндоцитоза рецептора ЭФР в эМСК после запуска в них эндоцитоза ЭФР в концентрациях 2 нМ и 10 нМ
    • 3.1.1. Оценки количества ЭФР- и рЭФР- позитивных везикул и колокализации ЭФР с рЭФР в эМСК
    • 3.1.2. Оценка количества в эМСК везикул, содержащих маркеры
    • 3.1.3. Оценка динамики взаимодействия ЭФР-позитивных везикул с ЕЕА1 и APPL1
    • 3.1.4. Оценка колокализации ЭФР-позитивных везикул с Rab7- везикулами
    • 3.1.5. Оценка колокализации ЭФР- и рЭФР- позитивных везикул с ЕЕА1 и LAMP1
  • 3.2. Исследование активации МАРК- и АКТ- каскадов в эМСК после стимуляции в них эндоцитоза ЭФР в концентрациях 2 нМ и 10 нМ
• ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ
• ГЛАВА 5. ВЫВОДЫ
• СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ
• ПРИЛОЖЕНИЕ 1
• ПРИЛОЖЕНИЕ 2
• ПРИЛОЖЕНИЕ 3
• ПРИЛОЖЕНИЕ 4