Данная работа посвящена исследованию влияния лигандов рецептора ЭФР (ЭФР, AREG и TGF-α) на эМСК человека линии 2804. В ходе работы решались такие задачи, как оценка количества рЭФР в различных линиях МСК и опухолевых клеток человека, исследование концентрационных зависимостей влияния ЭФР, TGF-α и AREG на активацию рЭФР, а также Erk1/2, Akt, Stat3 в эМСК человека, выяснение влияние лигандов рЭФР на миграцию эМСК человека. Были использованы методики культивирования клеток человека, проведение электрофоретического разделения белков и иммуноблотинг клеточного лизата, метод экспериментальной раны (scratch-assay). По итогу работы получены сравнительная оценка содержания рЭФР в различных линиях МСК и опухолевых клеток человека, концентрационные зависимости влияния AREG, ЭФР и TGF-α на активацию рЭФР и сигнальных киназ (Erk1/2, Akt, Stat3), вовлеченных в основные сигнальные пути от рЭФР в эМСК человека, исследовано влияние лигандов рЭФР на миграцию эМСК человека. Мы показали, что эМСК экспрессируют довольно большое количество рЭФР. Известно, что ЭФР и амфирегулин участвуют в эстроген-зависимой регуляции функций эндометрия. Тем не менее, влияние нативных лигандов рецептора ЭФР на эМСК, выделенных из менструальной крови, практически не изучено, в следствие чего полученные результаты обладают высокой степенью новизны.

The given work is devoted to evaluation of the effect of EGFR ligands (EGF, AREG, and TGF-α) on human eMSC line 2804. In the course of this work, such tasks as estimation of the amount of EGFR in various lines of human MSC and tumor cells, investigation of concentration dependencies of the effect of EGF, TGF-α and AREG on activation of EGFR, as well as Erk1/2, Akt, Stat3 in human eMSC, clarification of the effect of EGFR ligands on migration of human eMSC were solved. Methods used in this work include cell culture, electrophoresis followed by immunoblotting of cell lysate, an experimental wound method (scratch-assay). As a result of this work, a comparative estimate of the content of EGFR in various lines of human MSC and tumor cells was obtained, concentration dependencies of the influence of AREG, EGF and TGF-α on activation of EGFR and signal kinases (Erk1/2, Akt, Stat3) involved in the main signal pathways from EGFR in human eMSC were studied, effect of EGFR ligands on human eMCS migration was investigated. We have showed that eMSC express quite a large amount of EGFR. EGF and amphiregulin are known to be involved in estrogen-dependent regulation of endometrial functions. However, effects of native EGFR ligands on eMCS isolated from menstrual blood havn't been studied, resulting in a high degree of novelty of this work.

• ВВЕДЕНИЕ
• СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
• ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
  • 1.1. Стволовые клетки и их классификация
  • 1.2. Общая характеристика мезенхимных стромальных клеток
  • 1.3 Общие сведения о рецепторе эпидермального фактора роста (рЭФР)
  • 1.4. Лиганды к рецептору эпидермального фактора роста
  • 1.5. Связывание лиганда с рецептором
  • 1.6. Характеристика эндоцитозного пути
  • 1.7. Отличительные эффекты, оказываемые лигандами на рЭФР
    • 1.7.1. Влияние лигандов рЭФР на рециклирование/деградацию лиганд-рецепторных комплексов:
    • 1.7.2. рН-чувствительность лиганд-рецепторного взаимодействия:
    • 1.7.3. Влияние лигандов рЭФР на уровень убиквитинирования рЭФР:
  • 1.8. Сигнальные пути от рЭФР
  • 1.9. Влияние различных лигандов рЭФР на картину фосфорилирования рецептора
  • 1.10. Физиологические концентрации ЭФР
  • 1.11. Зависимость активации основных сигнальных путей от рЭФР от концентрации лиганда
• ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
  • 2.1. Оценка количества рецептора ЭФР в различных линиях мезенхимных стромальных клеток и опухолевых клеток человека
  • 2.2. Исследование концентрационной зависимости влияния лигандов рЭФР на эМСК человека линии 2804
  • 2.3. Исследование миграции эндометриальных мезенхимных стромальных клеток человека в ответ на стимуляцию ростовыми факторами
• ГЛАВА 3. ИНФОРМАЦИОННЫЕ РЕСУРСЫ
• ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ
• ГЛАВА 6. ВЫВОДЫ
• СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ