Магистерская диссертация «Экспрессия генов мембранных белков и фер¬ментов лизосом в патогенезе болезни Паркинсона, ассоциированной с мутаци¬ями в гене GBA» посвящена оценке роли генов мембранных белков и фермен¬тов лизосом с болезнью Паркинсона (БП), ассоциированной с мутациями в гене GBA (GBA-БП). В ходе работы был собран банк CD45+ клеток периферической крови пациентов с БП, GBA-БП, бессимптомных носителей мутаций в гене GBA (GBA-носители) и контроля с последующей оценкой экспрессии генов LAMP2, LAMP2A, GLA, GALNS, а также уровня мРНК и белка гена альфа-синуклеина (α-синуклеин) в исследуемых группах с последующей оценкой ас¬социации всех исследуемых параметров с развитием БП у носителей мутаций в гене GBA. Магистерская диссертация выполнена на базе лаборатории молекулярной генетики человека НИЦ «Курчатовский институт» - ПИЯФ. Впервые показано, что носительство мутаций в гене GBA ассоциировано с повышенной экспресси¬ей гена α-синуклеина в CD45+ клетках крови, при этом только GBA-носители характеризуются повышенным уровнем белка гена α-синуклеина. Выявлено снижение экспрессии гена LAMP2 в CD45+ клетках крови у пациентов GBA-БП по сравнению с GBA-носителями, что позволяет предположить, что ген LAMP2 может являться триггером GBA-БП. В тоже время выявленное увеличение экс¬прессии генов GALNS, LAMP2A в CD45+ клетках крови у GBA-носителей по сравнению с контролем может свидетельствовать о вовлеченности этих генов в компенса¬торный механизм. При выполнении магистерской диссертации были проведены следующие эксперименты: выделение CD45+ клеток из цельной венозной крови, выделение тотальной РНК, синтез кДНК, ПЦР в режиме реального времени, иммунно-ферментный анализ, статистическая обработка данных.

The master's work «Expression profile of genes encoding membrane proteins and enzymes of lysosomes in pathogenesis of GBA-associated Parkinson’s disease» is devoted to studying of the involvement genes encoding membrane proteins and ly¬sosome enzymes in the pathogenesis of GBA-associated Parkinson’s disease (PD). CD45+ blood cell bank were generated from patients with GBA-associated Parkin¬son’s disease (GBA-PD), non-manifesting GBA carriers (GBA-carriers), PD patients and control. LAMP2, LAMP2A, GLA, GALNS expression and mRNA and protein lev¬els of alpha-synuclein (α- synuclein) were estimated in all groups with evaluation of association of all estimated parameters with development of GBA-PD. The master's work based on the Laboratory of Human Molecular Genetics NRC “Kurchatov Institute” – PNPI. Increased α-synuclein mRNA level in CD45+ blood cells of GBA-PD patients and GBA-carriers was shown while only GBA-carriers were characterized increased α-synuclein protein level in CD45+ blood cells com¬pared to all groups. LAMP2 expression in CD45+ blood cells was decreased in GBA-PD patients compared to GBA-carriers that may suggest the role of the LAMP2 gene as trigger of GBA-PD. Also GALNS, LAMP2A expression levels in CD45+ blood cells were increased in GBA-carriers compared to control. It might be suggested of involvement of these genes in compensatory mechanism protecting against of GBA-PD develop¬ment. In the course of master's work sequence of primers and probes were designed by Primer3. The following experiments were carried out: extraction CD45+ blood cells, total RNA extraction, cDNA synthesis, real-time PCR to assess gene expression, en¬zyme-linked immunosorbent assay to assess protein level, statistical analysis.