Тема выпускной квалификационной работы: «Определение диагностической значимости неинвазивного метода выявления амилоида в моче». Данная работа посвящена изучению возможности использования неинвазивного теста на окрашивание белков мочи пациентов амилоид-специфическим красителем Конго красным для постановки диагноза амилоидоз почек. Задачи, которые решались в ходе исследования: 1. Осуществить сбор и пробоподготовку образцов мочи пациентов с диагнозом нефропатия и контрольной группы. 2. Проанализировать собранные образцы с помощью CRD-теста и рассчитать коэффициент удержания красителя Конго красного на мембране (CRR). 3. Определить пороговое значение показателя CRR, указывающего на наличие амилоидоза. 4. Провести статистическую обработку данных для определения специфичности методики. 5. Провести окрашивание препаратов мочи Конго красным с последующей микроскопией в поляризованном свете. Работа была выполнена в лаборатории биохимического гомеостаза НИИ Нефрологии ФГБОУ ВО ПСПбГМУ им. ак. И.П. Павлова Минздрава России и лаборатории биологии амилоидов СПбГУ. Исследование одобрено локальным этическим комитетом ПСПбГМУ. В результате проделанной работы были собраны образцы пациентов с диагнозом нефропатия (амилоидоз почек и неамилоидный вариант нефропатии) и проанализированы в двух независимых экспериментах с помощью CRD-теста. Для каждого образца был рассчитан показатель CRR – коэффициент удержания красителя Конго красного на нитроцеллюлозной мембране. В результате было определено пороговое значение показателя CRR, указывающее на наличие диагноза амилоидоз почек и проведено окрашивание препаратов мочи Конго красным с последующей микроскопией в поляризованном свете, подтверждающей наличие амилоидных агрегатов в образцах мочи.

The subject of the graduate qualification work is «Determining the diagnostic significance of a non-invasive method for detecting amyloid in urine». The given work is devoted to studying of the possibility of using a non-invasive test for staining the urine proteins of patients with amyloid-specific dye Congo red for the diagnosis of kidney amyloidosis. The research set the following goals: 1. To carry out the collection and sample preparation urine samples from patients with a diagnosis of nephropathy and the control group. 2. Analyze the collected samples using a CRD test and calculate the retention coefficient of Congo red dye on the membrane (CRR). 3. Determine the range of values of the CRR indicator indicating the presence of amyloidosis. 4. Perform statistical data processing to determine the specificity of the method. 5. Perform staining of urine samples with Congo red followed by microscopy in polarized light. The work was performed in the laboratory of biochemical homeostasis research Institute of Nephrology of First Pavlov State Medical University of St. Petersburg and laboratory of amyloid biology, St. Petersburg State University. The study was approved by the local ethics Committee of SPbGMU. As a result of this work, samples of patients diagnosed with nephropathy (amyloidosis of the kidneys and non-amyloid variant of nephropathy) were collected and analyzed in two independent experiments using a CRD-test. For each sample, a CRR indicator was calculated – the retention coefficient of the Congo red dye on the nitrocellulose membrane. As a result, the threshold value of the CRR indicator was determined, indicating the presence of a diagnosis of kidney amyloidosis, and the urine samples were stained Congo red with subsequent microscopy in polarized light, confirming the presence of amyloid aggregates in the urine samples.

• РЕФЕРАТ
• СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ АББРЕВИАТУР и сокращений
• ВВЕДЕНИЕ
• Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
  • 1.1. История изучения амилоидов
  • 1.2. Биохимическая характеристика амилоида
  • 1.3. Типы амилоидоза
  • 1.3.1. Амилоидоз почек
  • 1.4. Эпидемиология
  • 1.5. Диагностика амилоидоза
  • 1.6. Клинические проявления амилоидоза
  • 1.7. Лечение амилоидоза
  • 1.8. Современные подходы в диагностике амилоидоза
• глава 2. Материалы и методы
  • 2.1. Сбор и подготовка биоматериала
  • 2.2. CRD-тест
  • 2.3. Экспресс-версия CRD-теста
  • 2.4. Расчет CRR
  • 2.5. Статистическая обработка данных
  • 2.6. Поляризационная микроскопия
• глава 3. Результаты
  • 3.1. Оценка образцов в CRD-тесте
  • 3.2. Результаты поляризационной микроскопии
• Глава 4. Обсуждение
• Заключение
• Список использованных источников