Белок EB3 крепится к положительному концу растущих нейрональных микротрубочек и регулирует их динамику. Гиперэкспрессия ЕВ3 вызывает значительное увеличение числа дендритных шипиков грибовидного типа в первичных гиппокампальных нейронах. В работе рассмотрено нейропротекторное влияние белка EB3 на гиппокампальные нейроны в условиях низкой амилоидной токсичности, моделирующей болезнь Альцгеймера. Кластеризация белка PSD-95 связана со стабильностью дендритных шипиков. Автором разработан методический подход для анализа плотности и размеров кластеров белка PSD-95 в дендритах нейронов с применением локальной бинаризации после коррекции фона и устранении шума на конфокальных изображениях. Показано, что гиперэкспрессия белка EB3 вызывает увеличение ширины головки грибовидных шипиков нейронов и плотности кластеров белка PSD-95 в дендритах в сравнении с контрольной группой, но не изменяет их размер. Вирус-опосредованный нокдаун белка EB3 приводит к значительному уменьшению плотности и размера кластеров постсинаптического белка PSD-95. Вирус-опосредованная гиперэкспрессия белка EB3 при добавлении токсичных для нейронов олигомерных форм бета-амилоида предотвращает снижение плотности и ширины головки дендритных шипиков, а также снижение плотности кластеров белка PSD-95. Полученные результаты подтверждают гипотезу о том, что белок EB3 крайне важен для стабилизации постсинатических контактов в норме и снижает дегенеративное проявления в нейронах в условиях низкой амилоидной токсичности.

The EB3 protein fastens to the positive end of growing neuronal microtubules and regulates their dynamics. It is known that hyperexpression of EB3 protein leads to a significant increase in mushroom spines to the dominant fraction in primary hippocampal neurons. This study examines the neuroprotective influence of EB3 protein on hippocampal neurons under conditions of low amyloid toxicity modeling Alzheimer's disease. PSD-95 protein clustering is connected with the stability of dendritic spines. The author developed a methodological approach to analyze the density and size of the PSD-95 protein clusters in neuronal dendrites using local binarization when the background correction and noise elimination in confocal images had been made. It was shown that overexpression of EB3 protein causes an increase in the head width of neuronal mushroom-shaped spines and the density of PSD-95 protein clusters in dendrites compared with the control group, although if does not change their size. Virus-mediated knockdown of EB3 protein leads to a significant reduction in the density and cluster size of the postsynaptic PSD-95 protein. Virus-mediated overexpression of EB3 protein prevents a decrease in the density and width of dendritic spines heads, as well as a decrease in the density of PSD-95 protein clusters, while toxic for neurons oligomeric forms of beta-amyloid are added. Due to results of the current study the hypothesis was confirmed. The EB3 protein is extremely important for postsynaptic contacts stabilization in normal conditions. The EB3 protein reduces the degenerative manifestations in neurons under conditions of low amyloid toxicity.