Работа посвящена выявлению активности кальций-зависимых калиевых (KCa) каналов малой (SK) и средней (IK) проводимости и оценке их вклада в калиевый транспорт в клетках миелоидной лейкемии человека линии К562. Тематика научного направления является важной в рамках вопроса определения молекулярных партнеров механочувствительных кальций-проводящих каналов в комплексах с KCa каналами, а также для выявления новых потенциальных мишеней для селективной онкотерапии. С помощью иммунофлюоресцентного окрашивания была показана экспрессия KCa каналов IK, SK2, SK3. Идентификацию молекулярной принадлежности каналов проводили с помощью селективного ингибиторного анализа. Основной экспериментальный подход - метод патч-кламп в конфигурации whole-cell (регистрация интегральных токов от всей клетки). Для оценки уровня активности SK и IK каналов были записаны токи в контроле (до подачи ингибиторов) и после их добавления во внеклеточный раствор. Далее, для оценки вклада SK и IK каналов в калиевые токи были рассчитаны средние значения интегрального тока до и после добавления ингибиторов. Выявлено, что средний вклад калиевых токов, переносимых каналами SK, составляет 42,68 ± 5,59 %, а суммарный вклад каналов SK и IK - 71,10 ± 9,96 % от контрольных значений калиевого тока. Результаты свидетельствует о том, что повышение концентрации внутриклеточного кальция может стимулировать активность нескольких типов KCa каналов, которые вносят значительный вклад в интегральные калиевые токи в клетках К562.

The work is devoted to the identification of the activity of calcium-dependent potassium (KCa) channels of low (SK) and medium (IK) conductivity and the estimation of their contribution to potassium transport in human myeloid leukemia K562 cells. The research area is important in terms of determining the molecular partners of mechanosensitive calcium-permeable channels in complexes with KCa channels, as well as for identifying new potential targets for selective oncotherapy. Immunofluorescence staining showed the expression of KCa channels IK, SK2, SK3. The identification of the molecular affiliation of the channels was carried out using selective inhibitor analysis. The main experimental approach is the patch-clamp method in the whole-cell configuration (registration of integral currents from the whole cell). For level assessment of activity of SK and IK channels, currents were recorded in the control (before the supply of inhibitors) and after they were added to the extracellular solution. Further, to assess the contribution of SK and IK channels to potassium currents, the average values of the integrated current were calculated before and after the addition of inhibitors. It was found that the average contribution of the potassium currents which are carried by the SK channels is 42.68 ± 5.59%, and the total contribution of the SK and IK channels is 71.10 ± 9.96% of the control values of the potassium current. The results indicate the increase of the intracellular calcium concentration can stimulate the several types activity of KCa channels, which make a significant contribution to the integral potassium currents in K562 cells.