Данная работа посвящена изучению физических основ метода флуоресцентной микроскопии полного внутреннего отражения и разработке на его основе схемы установки для детектирования одиночных молекул красителя родамина 6 G. В ходе работы были решены следующие задачи: обоснована применимость и актуальность выбранного метода, рассмотрены физические основы метода, разработана схема микроскопа, рассчитаны параметры схемы и приведено обоснование выбранных элементов. Новизна данной работы заключается в том, что разработанная схема установки имеет малые габариты, состоит из недорогостоящий элементов: полупроводникового лазера вместо твердотельного неодимового лазера, который используется в коммерческий приборов, а также альтернативная геометрия возбуждения флуоресценции, с помощью которой возможно уменьшить влияние фоновой засветки и увеличить соотношение сигнал/шум.

This work is devoted to the study of the physical foundations of the method of fluorescence microscopy of total internal reflection and the development on its basis of an experimental microscope scheme for the detection of single molecules of the dye rhodamine 6 G. In the course of the work the following problems were solved: the applicability and relevance of the selected method were considered, the physical foundations of the method, the optical scheme of the microscope was developed, the parameters of the scheme were calculated, and the substantiation of the selected elements was given. The novelty of this work lies in the fact that the developed setup scheme has small dimensions, consists of inexpensive elements: a semiconductor laser instead of a solid-state neodymium laser, which is used in commercial devices, as well as an alternative geometry of fluorescence excitation, with which it is possible to reduce influence of background light and increase the signal-to-noise ratio.

• СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
• ВВЕДЕНИЕ
• ГЛАВА 1. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРНЫХ ДАННЫХ
• 1.1. Актуальность исследования макромолекул на уро
• 1.2. Методы исследований
  • 1.2.1. Флуоресцентная конфокальная микроскопия
  • 1.2.2. Флуоресцентная корреляционная спектроскопия
  • 1.2.3. Флуоресцентная микроскопия в режиме полного
  • 1.2.4. Микроскопия STED
• Выводы
• ГЛАВА 2. ФИЗИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ МЕТОДА ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ М
• 2.1. Физические основы метода флуоресцентной микро
• 2.2. Доступные реализации флуоресцентной микроскоп
  • 2.3.1 Объективный метод
  • 2.3.2. Реализация на призме
• Вывод
• ГЛАВА 3. РАЗРАБОТКА ОПТИЧЕСКОЙ CХЕМЫ ДЛЯ ИССЛЕДОВА
• 3.1. Принципиальная схема флуоресцентного микроско
• 3.2. Обоснование выбора элементов схемы
  • 3.2.1. Лазер
  • 3.2.2. Объектив
  • 3.2.3. Фильтры
  • 3.2.4. Камера
• Вывод
• ЗАКЛЮЧЕНИЕ
• СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ