Тема выпускной квалификационной работы: «Влияние ингибирования водного канала аквапорина-4 на развитие нейродегенерации в нигростриатной системе при протеасомной дисфункции у крыс». Водный канал аквапорин 4 является важным компонентом глимфатической системы, обеспечивающей элиминацию амилоидных белков из головного мозга. Целью данного исследования является проверка рабочей гипотезы: применение ингибитора аквапорина-4 в лактацистиновой модели доклинической стадии болезни Паркинсона (БП) приводит к усилению процесса нейродегенерации в нигростриатной системе у крыс. Ингибирование аквапорина-4 проводили с помощью препарата TGN-020, модель доклинической стадии БП воспроизводили с помощью ингибитора протеасом лактацистина (ЛЦ). Для оценки нейродегенеративных изменений и двигательных нарушений применяли иммуногистохимические методы и поведенческие тесты. Применение ингибитора аквапорина-4 приводит к усилению нейродегенеративного процесса в ЛЦ-индуцированной модели БП, снижению уровня тирозингидроксилазы в нейронах кчЧС и развитию нарушения двигательных функций. Полученные результаты могут свидетельствовать о переходе от доклинической стадии БП к ранней клинической, и мы предполагаем, что аквапорин-4 может играть важную роль молекулярных механизмах, обеспечивающих защиту мозга от нейротоксических факторов.

The subject of the graduate qualification work is “Influence of aquaporin-4 water channel inhibition on the development of neurodegeneration in the nigrostriatal system during proteasome dysfunction in rats”. Water channel aquaporin-4 is a very important component of the glymphatic system which provides the elimination of metabolites (particularly amyloid proteins) from the brain. Our study was aimed to evaluate the effect of inhibition of aquaporin 4 on the development of neurodegeneration in the nigrostriatal system in the lactacystin (LC) model of the preclinical stage of PD. Aquaporin-4 was inhibited using the inhibitor TGN-020, the model of the preclinical stage of PD was reproduced using the proteasome inhibitor lactacystin (LС). To assess the neurodegenerative changes and motor impairment the immuhistochemical methods and behavioral tests were applied. The pretreatment with TGN-020 accelerated the neurodegeneration in nigrostriatal system, led to a decrease in the level of tyrosine hydroxylase in nigral neurons and caused motor dysfunction in model animals. These patterns may reflect the transition of the preclinical stage of PD to the early clinical, and we suppose that aquaporin-4 can play an important role in the molecular mechanisms protecting brain functions from neurotoxic factors.

• СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
• ВВЕДЕНИЕ
• ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
  • 1.1. Общие данные о болезни Паркинсона
  • 1.2. Патогенез БП
  • 1.3. Убиквитин-протеасомная система
  • 1.4. Экспериментальные модели болезни Паркинсона
  • 1.5. Глимфатическая система головного мозга
  • 1.6. Строение водного канала аквапорина-4
  • 1.7. Предположительная роль аквапорина-4 в нейропротекции
• ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
  • 2.1. Животные
  • 2.2. Подготовительный этап эксперимента
  • 2.3. Проведение операции
  • 2.4. Экспериментальные группы и применяемые препараты
  • 2.5. Методика проведения тестов на моторное поведение:
    • 2.5.1. Тест с семенами подсолнечника (Sunflower seed test)
    • 2.5.2. Тест открытое поле (open field test )
    • 2.5.3. Тест сужающаяся дорожка (Beam-walking test)
  • 2.6. Декапитация
  • 2.7. Подготовка срезов головного мозга на криостате
  • 2.8. Окрашивание нейронов по методу Ниссля
  • 2.9. Иммуногистохимическое исследование
  • 2.10. Анализ препаратов
  • 2.11. Статистическая обработка результатов
• ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ
  • 3.1. Оценка влияния операции по вживлению направляющих канюль, введения контрольного раствора и ингибитора аквапорина-4 на показатели моторного поведения и патоморфологические показатели нигростриатной системы
  • 3.2. Оценка влияния микроинъекций лактацистина на показатели моторного поведения и патоморфологические показатели нигростриатной системы
  • 3.3. Оценка влияния микроинъекций лактацистина и ингибитора аквапорина-4 на показатели моторного поведения и патоморфологические показатели нигростриатной системы
• ЗАКЛЮЧЕНИЕ
• ВЫВОДЫ
• СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ