Details

Title: Валидация набора для определения ДНК вирусного гепатита В методом ПЦР в реальном времени: выпускная квалификационная работа бакалавра: направление 19.03.01 «Биотехнология» ; образовательная программа 19.03.01_03 «Биотехнология (общий профиль)»
Creators: Мерхасина Маргарита Антоновна
Scientific adviser: Аронова Екатерина Борисовна
Organization: Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого. Институт биомедицинских систем и биотехнологий
Imprint: Санкт-Петербург, 2022
Collection: Выпускные квалификационные работы; Общая коллекция
Subjects: вирус гепатита В; полимеразная цепная реакция (ПЦР); диагностика; hepatitis b virus; polymerase chain reaction (PCR); diagnosis
Document type: Bachelor graduation qualification work
File type: PDF
Language: Russian
Level of education: Bachelor
Speciality code (FGOS): 19.03.01
Speciality group (FGOS): 190000 - Промышленная экология и биотехнологии
DOI: 10.18720/SPBPU/3/2022/vr/vr22-3438
Rights: Доступ по паролю из сети Интернет (чтение)
Additionally: New arrival
Record key: ru\spstu\vkr\18106

Allowed Actions:

Action 'Read' will be available if you login or access site from another network

Group: Anonymous

Network: Internet

Annotation

На 74 с., 26 рисунков, 33 таблицы, 12 приложений.Цель работы – оценка эффективности работы ПЦР-набора «Интифика ВГВ» (производитель: ГК “Алкор Био”, Россия) для определения вируса гепатита В при использовании сырья различных производителей.Задачи:1. Изучение литературы по теме работы;2. Подбор состава смеси для постановки ПЦР-РВ.Проверка эффективно­сти работы системы. Провести замену компонентов ПЦР-смеси: ПЦР-буфер, магний, dNTP’s (дезоксинуклеотидтрифостфаты), праймеры (с разными зондами), полимеразы;3. Модификация ПЦР-смеси путем добавления фермента УДГ (урацилдегидрогеназы);4. Апробация наборов на амплификаторе Light Cycler;5. Анализ полученных результатов.В качестве основного метода диагностики была выбрана ПЦР в реальном времени.  Обнаружение ДНК вируса гепатита В позволяет своевременно диагностировать заболевание и предотвратить возможные последствия. Целью работы являлся подбор компонентов ПЦР-смеси, что актуально при решении вопроса импортозамещения.

74 pages, 26 figures, 33 tables, 12 appendices.The purpose of the work is to evaluate the effectiveness of the PCR kit "Intifica HBV" (manufacturer: GC "Alcor Bio", Russia) for the detection of hepatitis B virus using raw materials from different manufacturers.Tasks:1. Study of literature on the topic of work;2. Selection of the composition of the mixture for setting PCR-RT, checking the efficiency of the system. Change the components of the PCR mixture: PCR buffer, magnesium, dNTP's (deoxynucleotide triphosphates), primers (with different probes), polymerases;3. Modification of the PCR mixture by adding the enzyme UDH (uracil dehydrogenase);4. Approbation of the kits on the Light Cycler;5. Analysis of the results.Real-time PCR was chosen as the main diagnostic method. Detection of hepatitis B virus DNA allows timely diagnosis of the disease and prevention of possible consequences. The aim of the work was to select the components of the PCR mixture, which is relevant when solving the issue of import substitution.

Document access rights

Network User group Action
ILC SPbPU Local Network All Read
External organizations N2 All Read
External organizations N1 All
Internet Authorized users SPbPU Read
Internet Authorized users (not from SPbPU, N2) Read
Internet Authorized users (not from SPbPU, N1)
-> Internet Anonymous

Table of Contents

  • ВВЕДЕНИЕ
  • 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
    • 1.1. Краткая характеристика гепатита B
    • 1.2. Строение вируса гепатита B
    • 1.3. Профилактика гепатита В
    • 1.5. Полимеразная цепная реакция
    • 1.6. История открытия полимеразной цепной реакции
    • 1.7. Суть метода полимеразной цепной реакции
    • 1.8. Преимущества метода ПЦР
    • 1.9. ПЦР в реальном времени (ПЦР-РВ) или количественная ПЦР
  • 1.10. Отличие метода ПЦР от ПЦР в режиме реального времени
    • 1.11. ПЦР диагностика гепатита В
  • 1.12. Набор «Интифика ВГВ» и принцип его действия
  • 4. ОБЕСПЕЧЕНИЕ БЕЗОПАСНОСТИ УСЛОВИЙ ТРУДА
  • 4.1. Оценка и анализ опасных и вредных производственных факторов
  • ЗАКЛЮЧЕНИЕ
    • СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ
  • ПРИЛОЖЕНИЯ
  • ПРИЛОЖЕНИЕ А. Результаты статистической обработки полученных значений постановки ПЦР. Постановка 1. Проверка ПЦР-буферов
  • ПРИЛОЖЕНИЕ Б. Таблица значений выхода по циклам. постановка 1.
  • Проверка ПЦР-буферов
  • ПРИЛОЖЕНИЕ В. Статистические данные. Постановка 2.
  • Проверка разных серий MgCl2 и dNTP.
  • ПРИЛОЖЕНИЕ Г. Таблица значений выхода по циклам. Постановка 2. Проверка разных серий MgCl2 и dNTP.
  • ПРИЛОЖЕНИЕ Д. Статистические данные. Постановка 3.
  • Проверка разных олигонуклеотидов (праймеров и зондов).
  • ПРИЛОЖЕНИЕ Е. Таблица значений выхода по циклам. Постановка 3.
  • Проверка разных олигонуклеотидов (праймеров и зондов).
  • ПРИЛОЖЕНИЕ Ж. Статистические данные. Постановка 4.
  • Проверка разных серий TaqAB и совместимость системы с внутренним
  • контрольным образцом
  • ПРИЛОЖЕНИЕ З. Таблица значений выхода по циклам. Постановка 4.
  • Проверка разных серий TaqAB и совместимость системы с внутренним
  • контрольным образцом
  • ПРИЛОЖЕНИЕ И. Статистические данные. Постановка 5.
  • Проверка возможности замены TaqAB полимеразы на TaqM полимеразу
  • ПРИЛОЖЕНИЕ К. Таблица значений выхода по циклам. Постановка 5.
  • Проверка возможности замены TaqAB полимеразы на TaqM полимеразу
  • ПРИЛОЖЕНИЕ Л. Статистические данные. Постановка 6.
  • Проверка работы системы с добавлением УДГ (урацилдегидрогеназы)
  • ПРИЛОЖЕНИЕ М. Таблица значений выхода по циклам. Постановка 6.
  • Проверка работы системы с добавлением УДГ (урацилдегидрогеназы).

Usage statistics

stat Access count: 4
Last 30 days: 3
Detailed usage statistics