Данная работа посвящена исследованию влияния структурированной поверхности поли-ε-капролактоновых (ПКЛ) матриц, полученных при различных условиях формирования, на модификацию аргинином и культивирование мезенхимальных стромальных клеток (МСК). Задачи, которые решались в ходе исследования: – разработать матрицы со структурированной поверхностью; – оценить влияние поверхностной структуры ПКЛ матриц на сорбцию аргинина; – изучить свойства матриц до и после модификации; – исследовать адгезию и пролиферацию МСК на модифицированных ПКЛ матрицах. Было описано получение матриц со структурированной поверхностью и доказано ее влияние на аргининовую модификацию и характеристики матриц. Было также выявлено, что присутствие аргинина на матрице улучшает адгезию и пролиферацию МСК. А структурированная поверхность без модификаций не оказывает существенного влияния на культивирование МСК. Работа выполнена в группе тканевой инженерии на базе Центра клеточных технологий ИНЦ РАН. При написании литературного обзора использовали следующие базы данных: Elsevier, ResearchGate и Pubmed. Статистическую обработку экспериментальных данных осуществляли с использованием пакета программ Microsoft Excel, GraphPad Prism 9 и Image J.

This work is devoted to the study of the effect of arginine modification of poly-ε-caprolactone (PCL) matrices obtained under various conditions of formation on the cultivation of mesenchymal stem cells. Tasks that were solved during the study: – to develop matrices with a structured surface; – to evaluate the effect of the surface structure of the PCL matrices on a sorption of arginine; – to study properties of the matrices before and after the modification; – to analyze the adhesion and proliferation of MSCs on the modified PCL matrices. The preparation of matrices with a structured surface was described and its effect on the arginine modification and characteristics of the matrices was proved. The presence of arginine on the matrix has been shown to improve MSCs adhesion and proliferation. A structured surface without modifications does not significantly affect the cultivation of MSCs. The work was performed in the tissue engineering group at the Center for Cell Technologies of the INC of the Russian Academy of Sciences. When writing the literary review, the following databases were used: Elsevier, ResearchGate and Pubmed. Statistical processing of experimental data was carried out using the Microsoft Excel software package, GraphPad Prism 9 and Image J.

• СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
• ВВЕДЕНИЕ
• 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
  • 1.1. Современные представления о тканевой инженерии
  • 1.2. Полимеры в тканевой инженерии
  • 1.3. Методы модификации поверхности полимерных матриц
  • 1.4. Способы анализа полимерных матриц
  • 1.5. Взаимодействие клеток с полимерными материалами
• 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
  • 2.1. Схема исследования
  • 2.2. Объекты и предмет исследования
  • 2.3. Материалы исследования
  • 2.4. Методы исследования
  • 2.4.1. Приготовление питательной среды для МСК
  • 2.4.2. Смена среды
  • 2.4.3. Пересев МСК
  • 2.4.4. Заморозка клеток
  • 2.4.5. Разморозка клеток
  • 2.4.6. Формирование матриц
  • 2.4.7. Модификация матриц
  • 2.4.8. Нингидриновая реакция для количественной оценки содержания аминокислот
  • 2.4.9. Калибровка нингидриновой реакции
  • 2.4.10. Метод генцианвиолетовой окраски для подсчета клеток на матрицах
  • 2.4.11. Калибровка окраски генцианвиолетом
  • 2.4.12. Измерение механических свойств модифицированных матриц
    • 2.4.13. Измерение краевого угла смачивания модифицированных матриц
    • 2.4.14. Флуоресцентное окрашивание клеток
• 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
  • 3.1. Получение матриц с различной поверхностной кристаллической структурой
  • 3.2. Влияния поверхностной структуры ПКЛ матриц на сорбцию аргинина
    • 3.2.1. Калибровка нингидриновой реакции
    • 3.2.2. Количество аргинина на модифицированных матрицах
  • 3.3. Оценка свойств ПКЛ матриц до и после модификации
    • 3.3.1. Анализ изменения поверхностной кристаллической структуры после модификаций
    • 3.3.2. Анализ гидрофильности поверхности ПКЛ матриц
    • 3.3.3. Измерение механических свойств модифицированных матриц
  • 3.4. Оценка адгезии МСК с помощью генцианвиолета
    • 3.5. Оценка эффективности модификации ПКЛ матриц
    • 3.6. Морфология МСК на ПКЛ матрицах
• 4. ОБЕСПЕЧЕНИЕ БЕЗОПАСНОСТИ УСЛОВИЙ ТРУДА
  • 4.1. Анализ опасных и вредных производственных факторов
    • 4.2. Мероприятия по пожаро-и взрывоопасности
• ЗАКЛЮЧЕНИЕ
• СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ
• ПРИЛОЖЕНИЕ А
• ПРИЛОЖЕНИЕ Б