Тема выпускной квалификационной работы: «Влияние предшественника никотинамидадениндинуклеотида на морфологические особенности органов-мишеней крыс с доксорубицин-индуцированной кардиомиопатией».Данная работа посвящена изучению влияния предшественника никотинамидадениндинуклеотида на морфологические особенности органов-мишеней крыс с доксорубицин-индуцированной кардиомиопатией.Объектом исследования в данной работе являются органы-мишени крыс с доксорубицин-индуцированной кардиомиопатией. Предмет исследования – морфологические изменения, происходящие в них при моделировании хронической доксорубицин-индуцированной кардиомиопатии.Цель исследования – оценить (по отдельным критериям) влияние предшественника никотинамидадениндинуклеотида на морфологические особенности органов-мишеней крыс с доксорубицин-индуцированной кардиомиопатией.В данной работе для решения поставленных задач использовались такие методы, как гистологическая обработка материала с необходимой для эксперимента вырезкой органов лабораторных животных, изготовление гистологических срезов и их окрашивание, а именно окраска гематоксилином-эозином и окраска по Маллори. Также использовался метод морфометрии, необходимый для анализа данных гистологического исследования.На первом этапе данной работы было проведено сравнительное исследование морфологических изменений в тканях левого желудочка миокарда крыс, вызванные введением различных кумулятивных доз доксорубицина в диапазоне 5-15 мг/кг, в ходе которого были выявлены следующие характерные изменения: некроз и апоптоз кардиомиоцитов с диапедезными кровоизлияниями в них, лимфоплазмоцитарная инфильтрация, присутствие кардиомиоцитов с вакуолизированной цитоплазмой, а также наличие коллагенового фиброза. Выраженность оказываемых эффектов в отношении тканей миокарда зависела от кумулятивной дозы препарата. С увеличением дозы доксорубицина в диапазоне 5-15 мг/кг – выраженность нарастала.Кроме того, была определена кумулятивная доза доксорубицина, равная 10 мг/кг, которая может рассматриваться в качестве оптимальной кумулятивной дозы, обеспечивающей системную токсичность и морфологические изменения в тканях миокарда при достаточной выживаемости животных для моделирования хронической доксорубицин-индуцированной кардиомиопатии.На следующем этапе работы были подтверждены кардиопротективные эффекты предшественника никотинамидадениндинуклеотида – никотинамид рибозида, и определены режимы инфузии данного препарата, которые обеспечивают достоверно значимое снижение площади коллагенового фиброза в разных зонах ткани левого желудочка сердца крыс на модели хронической доксорубициновой кардиомиопатии.Результаты исследования позволяют расширить имеющиеся представления о морфологических особенностях доксорубицин-индуцированного повреждения миокарда, а также могут использоваться при разработке подходов для превенции и лечения доксорубицин –индуцированной кардиомиопатии на основе предшественников никотинамидадениндинуклеотида.

The subject of the graduate qualification work is « Influence of the precursor nicotinamide adenine dinucleotide on the morphological features of target organs in rats with doxorubicin-induced cardiomyopathy».The given work is devoted to studying the effect of the precursor nicotinamide adenine dinucleotide on the morphological features of target organs in rats with doxorubicin-induced cardiomyopathy.The object of study in this work is the target organs of rats with doxorubicin-induced cardiomyopathy. The subject of the study is the morphological changes that occur in them during the modeling of chronic doxorubicin-induced cardiomyopathy.The aim of the study was to evaluate (according to certain criteria) the effect of the precursor nicotinamide adenine dinucleotide on the morphological features of target organs in rats with doxorubicin-induced cardiomyopathy.In this work, to solve the tasks, we used such methods as histological processing of the material with the cutting of organs of laboratory animals necessary for the experiment, the preparation of histological sections and their staining, namely, hematoxylin-eosin staining and Mallory staining. The method of morphometry, necessary for the analysis of histological data, was also used.At the first stage of this work, a comparative study of morphological changes in the tissues of the left ventricle of the myocardium of rats, caused by the introduction of various cumulative doses of doxorubicin in the range of 5-15 mg/kg, was carried out, during which the following characteristic changes were revealed: necrosis and apoptosis of cardiomyocytes with diapedetic hemorrhages in them, lymphoplasmacytic infiltration, the presence of cardiomyocytes with vacuolated cytoplasm, as well as the presence of collagen fibrosis. The severity of the effects on myocardial tissues depended on the cumulative dose of the drug. With an increase in the dose of doxorubicin in the range of 5-15 mg/kg, the severity increased.In addition, a cumulative dose of doxorubicin was determined equal to 10 mg/kg, which can be considered as the optimal cumulative dose that provides systemic toxicity and morphological changes in myocardial tissues with sufficient animal survival to model chronic doxorubicin-induced cardiomyopathy.At the next stage of the work, the cardioprotective effects of the precursor of nicotinamide adenine dinucleotide, nicotinamide riboside, were confirmed, and the infusion regimes of this drug were determined, which provide a significantly significant decrease in the area of ​​collagen fibrosis in different areas of the tissue of the left ventricle of the rat heart in a model of chronic doxorubicin cardiomyopathy.The results of the study allow us to expand the existing understanding of the morphological features of doxorubicin-induced myocardial damage, and can also be used in the development of approaches for the prevention and treatment of doxorubicin-induced cardiomyopathy based on nicotinamide adenine dinucleotide precursors.

• 1.1. Распространенность онкологических заболеваний
• 1.2. Осложнения применения антрациклиновых антибиотиков
• 1.2.1. Классификация антрациклиновой кардиотоксичности по срокам возникновения
• 1.2.2. Дозозависимый характер развития антрациклиновой кардиомиопатии
• 1.3. Доксорубицин и его свойства, получение доксорубицина
• 1.3.1. Основные механизмы развития доксорубициновой кардиомиопатии
• 1.3.2. Методы превенции и лечения сердечно-сосудистых осложнений на фоне лечения доксорубицином
• 1.4. Никотинамидадениндинуклеотид, его свойства, строение, функции и предшественники
• 1.5. Экспериментальные модели доксорубицин-индуцированной кардиомиопатии
• 1.5.1. Модели антрациклиновой кардиомиопатии на крысах
• ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
• 2.1. Протокол эксперимента и этические принципы использования животных
• 2.2. Дизайн исследования
• 2.3. Фиксация и проводка ткани в автоматическом гистологическом процессоре «Vip5Jr»
• 2.4. Микротомирование гистологического материала и его подготовка к окрашиванию
• 2.5. Окрашивание гистологического материала
• 2.5.1. Окраска гематоксилином-эозином
• 2.5.2. Окраска «по Маллори»
• 2.6. Протоколы применяемых в работе окрасок
• 2.7. Программное обеспечение анализа цифрового изображения Nis-Elements
• 2.8. Программное обеспечение Orbit Image Analysis
• 2.9. Статистическая обработка данных
• ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
• 3.1. Оценка выраженности морфологических изменений в миокарде крыс в условиях воздействия различных кумулятивных доз доксорубицина
• 3.2. Изучение морфологических изменений тканей в органах – мишенях на модели хронической доксорубицин - индуцированной кардиомиопатии в условиях воздействия предшественника никотинамидадениндинуклеотида
• 3.2.1. Изучение морфологических изменений тканей в органах – мишенях на модели хронической доксорубицин - индуцированной кардиомиопатии в условиях воздействия предшественника никотинамидадениндинуклеотида
• 3.2.2. Оценка площади коллагенового фиброза в разных зонах сердечной ткани на модели хронической доксорубицин - индуцированной кардиомиопатии в условиях воздействия предшественника никотинамидадениндинуклеотида
• ЗАКЛЮЧЕНИЕ