Тема выпускной квалификационной работы: «Неканоническая роль электровозбудимых натриевых каналов в эндометриальных мезенхимных стволовых клетках человека». В данной работе исследовалась регуляция активности электровозбудимых натриевых каналов (Nav) в эндометриальных мезенхимных стволовых клетках человека (эМСК), а также роль этих каналов в процессах клеточной подвижности. С помощью анализа ОТ-ПЦР была выявлена экспрессия Nav 1.1, Nav 1.2, Nav 1.4 -1.9 в эМСК. А также была показана экспрессия ß1, ß3 и ß4 субъединиц. Используя метод патч-кламп в режиме регистрации токов whole-cell была изучена функциональная активность электровозбудимых натриевых каналов в мембране клеток эМСК. С помощью ингибиторного анализа было показано, что каналы являются ТТХ- чувствительными. Из полученных результатов можно сделать вывод, что наблюдаемые каналы могут относиться к одному из следующих вариантов: Nav 1.1, Nav 1.2, Nav 1.3, Nav 1.6, Nav 1.7. Так же, используя метод патч-кламп, было изучено влияние вератридина на биофизические свойства Nav эМСК. Вератридин в концентрации менее 40 мкМ ингибировал натриевые токи, а в несколькими экспериментах при подаче 100 мкМ вератридина наблюдали увеличение времени открытого состояния каналов. Миграционные свойства эМСК исследовали методом заживления «раны» и методом направленной миграции через полупроницаемую мембрану. Было выявлено, что вератридин уменьшает миграционную способность эМСК. ТТХ уменьшал скорость зарастания «раны», но не влиял на миграцию через полупроницаемую мембрану. Изучение Nav в эМСК является актуальной задачей, так как эМСК могут быть использованы в клеточной терапии. Полученные в исследованиях результаты показывают, что блокирование Nav каналов может ослаблять миграционную способность эМСК.

Theme: "Noncanonical role of voltage-gated sodium channels in human endometrial mesenchymal stem cells". In this work, we studied the regulation of the activity of voltage-gated sodium channels (Nav) in human endometrial mesenchymal stem cells (eMSCs) and the role of these channels in cell motility. RT-PCR analysis revealed the expression of Nav 1.1, Nav 1.2, Nav 1.4, Nav 1.5, Nav 1.6, Nav 1.7, Nav 1.8, Nav 1.9 in eMSCs. Also we showed the expression of ß1, ß3 and ß4 subunits. Using the patch-clamp method in the whole-cell configuration, we studied the functional activity of voltage-gated sodium channels in the membrane of eMSC. Inhibitor analysis showed that the channels are TTX-sensitive. From the data obtained, it can be concluded that the observed channels belong to one of the following options: Nav 1.1, Nav 1.2, Nav 1.3, Nav 1.6, Nav 1.7. We studied the effect of veratridine on the biophysical properties of Nav eMSCs using the patch-clamp method. Veratridine at a concentration of less than 40 μM inhibited sodium currents, and applying 100 μM of veratridine, increased the time of the open state of the channels. The migration properties of eMSCs studied by the wound healing assay and by the method of directed migration through a semipermeable membrane. Two methods have shown that veratridine reduces the migratory ability of eMSCs. TTX reduced the wound healing rate, but did not affect migration through the semipermeable membrane. The study of Nav in eMSCs is an urgent task, since eMSCs can be used in cell therapy. The results obtained in the studies show that the blocking of Nav channels can decrease the migratory ability of eMSCs.