Детальная информация

Данное исследование посвящено разработке экспериментальных клеточных модельных тест-систем для первичного in vitro скрининга фармакологических и химических веществ в целях определения их потенциальной возможности задержать или предотвратить помутнение задней капсулы хрусталика (ПЗК) после экстракапсулярной экстракции катаракты. С этой целью в работе использовали линии клеток переднего сегмента глаза человека: клетки конъюнктивы - Chang Conjunctiva Clone 1-5c-4 (CCL-20.2), клетки эпителия роговицы - Human Corneal Epithelial cells (HCE), лимбальные стволовые клетки - Limbal Stem Cells (LSC) и эпителиальные клетки хрусталика - Lens Epithelial Cells (LEC). Разработанные клеточные тест-системы были применены для оценки эффективности новых профилактических методов предотвращения ПЗК, основанных на использовании различных веществ в зависимости от их концентрации, комбинации, времени и очерёдности воздействия. Об эффективности судили по жизнеспособности клеток, которую оценивали по их морфологии методом световой микроскопии в процессе прижизненного наблюдения и метаболической активности с использованием МТТ-теста. Полученные результаты являются основополагающими в подходах к разработке фармакологических методов предотвращения помутнения задней капсулы хрусталика.

This work is devoted to the development of experimental cellular model test systems for primary in vitro screening of pharmacological and chemical substances in order to determine their potential to delay or prevent Posterior Capsule Opacification (PCO) after extracapsular cataract extraction. For this purpose, cell lines of the anterior segment of the human eye were used in the work: Chang Conjunctiva Clone 1-5c-4 (CCL-20.2), Human Corneal Epithelial cells (HCE), Limbal Stem Cells (LSC) and Lens Epithelial Cells (LEC). The developed cellular test systems were used to evaluate the effectiveness of new preventive methods for preventing PCO based on the use of various substances depending on their concentration, combination, time and sequence of exposure. Efficacy was assessed by cell viability, which was assessed by their morphology by light microscopy during lifetime observation and metabolic activity using the MTT-assay. The results obtained are fundamental in approaches to the development of pharmacological methods for preventing opacification of the posterior lens capsule.

• СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ
• ВВЕДЕНИЕ
• ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
  • 1.1. Оптическая система органа зрения. Хрусталик
  • 1.2. Катаракта и помутнение задней капсулы хрусталика. Методы лечения
  • 1.3. Потенциальные химические/фармакологические агенты предотвращения помутнения задней капсулы хрусталика
  • 1.4. Модельные системы в разработке методов предотвращения помутнения задней капсулы хрусталика
• ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
  • 2.1. Клеточные культуры
  • 2.2. Получение клеточной культуры LEC человека
  • 2.3. Стандартные условия культивирования
  • 2.4. Вещества и схемы их предполагаемого использования для предотвращения ПЗК
  • 2.5. Прижизненный анализ морфологии клеток (метод световой микроскопии)
  • 2.6. Анализ метаболической активности клеток (MTT-тест)
  • 2.6. Статистическая обработка данных
• ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
  • 3.1. Получение клеточной культуры LEC человека и оценка возможности использования ее для создания клеточной модельной системы
  • 3.2. Первичный скрининг веществ, входящих в схемы фармакологических методов предотвращения ПЗК
  • 3.3. Первичный скрининг предлагаемых схем последовательной внутрикапсулярной инстилляции веществ для предотвращения ПЗК
  • 3.4. Повторный скрининг веществ и схем последовательной инстилляции веществ при отложенном времени оценки их воздействия
  • 3.5. Скрининг веществ и схем последовательной инстилляции веществ при уменьшении времени их воздействия
• СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ