На 74 с., 26 рисунков, 33 таблицы, 12 приложений.Цель работы – оценка эффективности работы ПЦР-набора «Интифика ВГВ» (производитель: ГК “Алкор Био”, Россия) для определения вируса гепатита В при использовании сырья различных производителей.Задачи:1. Изучение литературы по теме работы;2. Подбор состава смеси для постановки ПЦР-РВ.Проверка эффективности работы системы. Провести замену компонентов ПЦР-смеси: ПЦР-буфер, магний, dNTP’s (дезоксинуклеотидтрифостфаты), праймеры (с разными зондами), полимеразы;3. Модификация ПЦР-смеси путем добавления фермента УДГ (урацилдегидрогеназы);4. Апробация наборов на амплификаторе Light Cycler;5. Анализ полученных результатов.В качестве основного метода диагностики была выбрана ПЦР в реальном времени. Обнаружение ДНК вируса гепатита В позволяет своевременно диагностировать заболевание и предотвратить возможные последствия. Целью работы являлся подбор компонентов ПЦР-смеси, что актуально при решении вопроса импортозамещения.
74 pages, 26 figures, 33 tables, 12 appendices.The purpose of the work is to evaluate the effectiveness of the PCR kit "Intifica HBV" (manufacturer: GC "Alcor Bio", Russia) for the detection of hepatitis B virus using raw materials from different manufacturers.Tasks:1. Study of literature on the topic of work;2. Selection of the composition of the mixture for setting PCR-RT, checking the efficiency of the system. Change the components of the PCR mixture: PCR buffer, magnesium, dNTP's (deoxynucleotide triphosphates), primers (with different probes), polymerases;3. Modification of the PCR mixture by adding the enzyme UDH (uracil dehydrogenase);4. Approbation of the kits on the Light Cycler;5. Analysis of the results.Real-time PCR was chosen as the main diagnostic method. Detection of hepatitis B virus DNA allows timely diagnosis of the disease and prevention of possible consequences. The aim of the work was to select the components of the PCR mixture, which is relevant when solving the issue of import substitution.
