Детальная информация

В рамках работы получен мутантный вариант гена нуклеопротеина аттенуированного вируса гриппа А/Гонконг/1/68/162/35 (H3N2). Мутантный ген, кодирующий белок NP c реверс-заменой 292G→ E клонирован в вектор pHW2006, в результате сконструирована плазмида pHW-HK-NPmut. Плазмида накоплена в штамме E.coli DH5α и очищена в препаративном количестве 1 мкг/мкл. Полученная плазмида использована для сборки методом обратной генетики вируса-реассортанта A/Texas/HK/6:2 NPmut/2014, несущего ген NP c реверс-мутацией 292G→ E. Реассортант получен в культуре клеток Vero, затем накоплен в куриных эмбрионах. Проведено сравнение признаков аттенуации полученного нами вируса и вируса без мутации в NP по показателю инфекционной активности при различных температурах. Показано, что мутация E292G в NP существенно снижает холодовую адаптацию вируса, в то время как на температурочувствительный признак влияния не оказывает.