Целью данной работы является поиск подходов для выяснения происхождения опухолевых клеток глиомы человека. Образцы опухолевой ткани больных глиомой и полученные из них клеточные культуры анализировались методом ОТ ПЦР на предмет экспрессии молекулярных маркеров, специфичных для различных клеток нервной ткани (Tuj1, NeuN, MOG, MBP, NG2, Olig2, Nestin, Vimentin, GFAP, Aldh1L1), маркеров стволовых (Sox2, Oct4, C-Kit) и раковых стволовых (CD133) клеток. Тумарогенность клеток в культуре проверялась путём ксенотрансплантации в крысиный мозг. Выявленные закономерности в профиле экспрессии молекулярных маркеров отражают свойства глиомных опухолей и полученных из них клеточных культур и позволяют судить о границах применимости используемых методов в изучении происхождения опухолевых клеток.

• Введение
• 1. Обзор литературы
  • 1.1. Глиома человека
  • 1.2. Стволовые клетки и раковые стволовые клетки
  • 1.3. Модели, объясняющие гетерогенность опухоли
  • 1.4. Методы лабораторного исследования глиомы
  • 1.5. Клетки происхождения глиомной опухоли
  • 1.6. Постнатальный нейрогенез в мозге человека
  • 1.7. Набор молекулярных маркеров для выявления клеток происхождения глиомной опухоли
• 2. Материалы и методы
  • 2.1. Объект исследования
  • 2.2. Методы работы с клетками в культуре
    • 2.2.1. Получение первичной культуры клеток глиомы
    • 2.2.2. Культивирование клеток
    • 2.2.3. Построение кривых роста
    • 2.2.4. Кальций-фосфатная трансфекция
    • 2.2.5.Лентивирусная инфекция
  • 2.3. Молекулярные методы
    • 2.3.1. Выделение РНК и обратная транскрипция
    • 2.3.2. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
    • 2.3.3. Электрофорез ДНК в агарозном геле
  • 2.4. Дизайн праймеров
  • 2.5. Ксенотрансплантация клеток глиомы в мозг крысы
• 3. Результаты и обсуждения
  • 3.1. Характеристика первичных культур клеток глиомы
    • 3.1.1 Получение клеточных культур, использованных в исследовании
    • 3.1.2. Ксенотрансплантация клеточных культур в крысиный мозг
    • 3.1.3. Сравнение клеточных культур с образцами опухолевой ткани, из которых культуры были получены, методом ОТ ПЦР
  • 3.2. Сравнение образцов опухоли с образцами предположительно здровых участков мозга тех же пациентов по экспрессии молекулярных маркеров методом ОТ ПЦР
  • 3.3. Сравнение образцов глиомных опухолей различного типа между собой по экспрессии молекулярных маркеров методом ОТ ПЦР
• Выводы
• Список использованных источников