Details

Целью работы являлось исследование влияния физико-химических свойств среды, а именно внеклеточного рН, на активность кальциевых каналов TRPV5/V6 в Т-лимфоцитах человека. C помощью метода patch-clamp проводилась регистрация токов через каналы TRPV5/V6. Внутриклеточная концентрация кальция измерялась с помощью флуоресцентного кальциевого зонда FURA-2AM. Показано, что активность каналов TRPV5/V6 и вход Са{2+}в Т-клетках Jurkat регулируются внеклеточным рН. Повышение рН существенно увеличивает активность каналов TRPV5/V6 и вход Са{2+} в клетки, а снижение рН уменьшает активность каналов TRPV5/V6 и вход Са{2+} в клетки. Также получены данные, что внеклеточный рН действует на каналы TRPV5/V6 не напрямую, влияя на проводящие свойства поры, а в качестве регулятора эндо/экзоцитоза, участвуя в доставке каналов на мембрану и их уходе с плазматической мембраны в клетку.

The aim of this work was to investigate the influence of extracellular pH on the activity of calcium channels TRPV5/V6 in human T-lymphocytes. The TRPV5/V6 channel currents were recorded using the patch-clamp technique. The intracellular calcium concentration was measured by using the fluorescent calcium probe FURA-2AM. It was demonstrated that the activity of TRPV5/V6 channels and Са{2+} entry in Jurkat T cells is regulated by extracellular pH. Extracellular alkalinization significantly increased the activity of TRPV5/V6 channels and Са{2+} entry in cells, and extracellular acidification decreased the TRPV5/V6 activity and Са{2+} entry in cells. The data were received that the extracellular pH affects TRPV5/V6 channels indirectly, does not influence conductive properties of the channel pore. Furthermore, it was shown that the extracellular pH affects TRPV5/V6 channels as a regulator of the endo/exocytosis, and takes part in elevation of the channels to the plasma membrane and in their retrieval from the plasma membrane to the cytosolic compartment.