Детальная информация

В настоящем исследовании оптимизирован метод определения тиолпероксидазной активности для работы с маткой мышей в качестве биоматериала. Было показано, что зависимость расхода гомоцистеина в ферментативной реакции (активности фермента) от содержания биоматериала в реакционной смеси имеет линейный характер, что дает возможность в дальнейшем работать с различными разведениями биоматериала. При фиксированной концентрации гомоцистеина порядка 1.05 мкмоль/мл, была определена концентрация трет-бутилгидропероксида равная 1.6 мкмоль/мл, которая является насыщающей для тиолпероксидазы ткани матки мышей и может быть выбрана как оптимальная для определения активности фермента (при pH 8.5 и температуре инкубации 37°C). При использовании в качестве биоматериала супернатанта 33% гомогената матки скорость реакции оказалась постоянной в течение первых 60 секунд инкубации, т.е не происходит её преждевременного снижения. Полученные результаты означают, что используемые параметры и методы пригодны для количественного определения тиолпероксидазной активности в ткани матке мышей.