Details

L-фукоза и L-фукоз-содержащие конъюгаты вносят важный вклад в протекание различных физиологических и патологических процессов, чем и привлекают интерес исследователей. Одним из двух типов ферментов, преобразующих фукоз-содержащие конъюгаты, являются фукозидазы. α-L-фукозидазы – гликозидгидролазы, катализирующие реакции гидролиза фукозидных связей с образованием молекул L-фукозы. Целью данной работы являлась физико-химическая характеристика минорной α-L-фукозидазы FFpI из F. proliferatum LE1. Была создана система экспрессии FFpI в дрожжах P. pastoris GS115. В ходе работы была разработана схема выделения и очистки фермента. Для реакции гидролиза модельного субстрата пара-нитрофенил-α-L-фукозида, катализируемой ферментом, определили оптимальные значения pH и температуры, а также кинетические параметры реакции. Была показана способность FFpI катализировать реакцию гидролиза пропил-фукозида и реакцию трансгликозилирования. Проведено моделирование структур двух α-L-фукозидаз, продуцируемых F. proliferatum LE1, и их сравнительный анализ с целью объяснения различий в их свойствах. Результаты работы послужат основой для дальнейших исследований минорного фермента α-L-фукозидазы FFpI и поиска его практического применения в биотехнологии.