Тема выпускной квалификационной работы: «Везикулы растительного происхождения как переносчики биоактивных молекул». Данная работа посвящена растительным экстраклеточным везикулам (РЭВ). Целью данной работы стал поиск среди РЭВ перспективного доставщика экзогенных молекул к клеткам человека in vitro. Выделенные методом ультрацентрифугирования из сока плодов 7-ми высших растений и культуральной среды 2-х типов одноклеточных водорослей РЭВ были изучены методами анализа траектории наночастиц (nanoparticle tracking analysis - NTA), атомно-силовой микроскопии (AFM), криоэлектронной микроскопии (cryogenic electron microscopy - Cryo-EM), электрофоретического рассеяния света. При помощи этих методов были оценены размеры, концентрация, морфология и дзета-потенциал частиц. Эффективность нагрузки РЭВ экзогенным белком была оценена методом флуориметрии, а эффективность доставки флуоресцентно меченного белка HSP70-Alexa при помощи РЭВ в клетки человека in vitro оценивалась при помощи проточной цитометрии. По полученным результатам был произведен сравнительный анализ всех РЭВ по эффективности нагрузки и доставки экзогенного белка. В результате работы, были определены наиболее перспективные в индустриальном ключе продуценты РЭВ по соотношению эффективность доставки/эффективность выхода.

The subject of the graduate qualification work is “Plant vesicles as carriers of bioactive molecules”. The given work is devoted to plant extracellular vesicles (PEVs). The aim of this work was to search among PEVs for a promising supplier of exogenous molecules to human cells in vitro. PEVs was isolated by ultracentrifugation from the fruit juice of 7 higher plants and the culture medium of 2 types of unicellular algae. PEVs were studied by nanoparticle tracking analysis (NTA), atomic force microscopy (AFM), cryogenic electron microscopy (Cryo-EM), electrophoretic light scattering. These methods were used to evaluate particle size, concentration, morphology, and zeta potential. The efficiency of loading PEVs with an exogenous protein was assessed by fluorimetry, and the efficiency of delivery of the fluorescently labeled HSP70-Alexa protein by PEVs to human cells in vitro was evaluated using flow cytometry. Based on the results obtained, a comparative analysis of all PEVs was carried out in terms of the efficiency of loading and delivery of exogenous protein. Thus, PEVs producers were identified, which in the future will be used as delivery systems for bioactive molecule.