С момента разработки концепции генной терапии прошло уже более 50 лет, однако исследования по поиску эффективных и безопасных средств доставки терапевтических нуклеиновых кислот остаются актуальными из-за низкого количества одобренных генотерапевтических препаратов. Данная работа посвящена оценке эффективности проникающего в клетку пептида EB1 и катионных липосом 2Х3-DOPE+DSPE-PEG2000 (0.62%) в качестве средств доставки малых интерферирующих РНК (миРНК). Удобной моделью для этого является заболевание хронического миелолейкоза, развивающееся в результате возникновения одной хромосомной мутации, приводящей к образованию онкогена BCR-ABL, белковый продукт которого стимулирует аномальную пролиферацию клеток. На первом этапе комплексы миРНК с пептидом EB1, а также с катионными липосомами были получены и охарактеризованы. На следующем этапе была оценена эффективность трансфекции клеток К-562 комплексами с помощью проточной цитофлуориметрии и конфокальной микроскопии. Эффект миРНК при доставке исследуемыми комплексами оценивали по снижению экспрессии гена BCR-ABL, а также по уменьшению уровня аномальной пролиферации клеток К-562. Было показано, что катионные липосомы 2Х3-DOPE+DSPE-PEG2000 (0.62%) более эффективно доставляют миРНК в клетки на модели хронического миелолейкоза in vitro.

More than 50 years have passed since the concept of gene therapy was developed. However, research to find effective and safe delivery vectors of therapeutic nucleic acids remains relevant due to the low number of approved gene therapy drugs. The given work is devoted to efficiency evaluation of cell-penetrating peptide (CPP) EB1 and 2Х3-DOPE+DSPE-PEG2000 (0.62%) cationic liposomes as small interfering RNA (siRNA) delivery system. Chronic myelogenous leukemia is a convenient model for this because this disease develops as a result of a single chromosomal mutation leading to the formation of oncogene BCR-ABL. The protein product of this gene stimulates abnormal cell proliferation. In the first step, siRNA complexes with EB1 peptide and with cationic liposomes were obtained and characterized. At the next stage, the efficiency of transfection of K-562 cells by the studied complexes was evaluated using flow cytofluorimetry and confocal microscopy. The effect of siRNA which was delivered by the studied complexes was analyzed by reducing of BCR-ABL gene expression and by a decrease of K-562 cell abnormal proliferation. The study showed that the use of 2Х3-DOPE+DSPE-PEG2000 (0.62%) cationic liposomes for siRNA delivery into cells was more effective in chronic myeloid leukemia model in vitro.