Тема выпускной квалификационной работы: «Разработка прототипа гибридной вакцины против обеих линий вируса гриппа В». Данная работа посвящена разработке прототипа живой гриппозной вакцины (ЖГВ), способной обеспечить защиту от двух генетических линий вируса гриппа типа В. Для получения вакцинных штаммов LAIV методом обратной генетики все гены аттенуированного донора, штамма B/USSR/60/69 (B60), клонировали в двунаправленные векторы. Генно-инженерный штамм В60-РГ (Обратная генетика) по своим фенотипическим характеристикам не отличался от исходного штамма В60, что представляет большую перспективу для создания генно-инженерных вакцинных штаммов. В работе получены два прототипа гибридных вакцинных штаммов, один из которых экспрессирует молекулу гемагглютинина (НА) из вируса линии Victoria и нейраминидазу (NA) из штамма линии Yamagata (HBNP), а второй экспрессирует HA из линии Yamagata. вирус и NA из линии Victoria (HPNB). Сконструированные вирусы обладали биологическими свойствами, характерными для классических штаммов ЖГВ типа В. Иммунизация мышей прототипами вакцин приводила к образованию высоких уровней антигемагглютининовых антител (Ат) к вирусам, содержащим гомологичный антиген НА. Анализ иммунного ответа методом ИФА на цельные вирусные антигены выявил высокий уровень перекрестной реактивности сывороточных антител IgG, тогда как сочетание поверхностных антигенов в составе гибридных вакцинных штаммов HBNP и HPNB повышало уровень антител к вирусу от у которых ген NA был унаследован по сравнению с классическими штаммами LAIV линии Victoria и линии Yamagata соответственно. Представленная стратегия может быть использована как основа для создания вакцины широкого спектра действия против антигенно удаленных вариантов вируса гриппа В.

The subject of the graduate qualification work is “Development of a hybrid vaccine prototype against both lineages of Influenza B virus”. This work is devoted to the development of a prototype live influenza vaccine (LAIV) capable of providing protection against two genetic lines of type B influenza virus. To obtain LAIV vaccine strains by reverse genetics, all genes of the attenuated donor, strain B/USSR/60/69 (B60), were cloned into bidirectional vectors. The genetically engineered B60-RG (Reverse genetics) strain did not differ in its phenotypic characteristics from the original B60 strain, which presents a better prospect for the construction of genetically engineered vaccine strains. Two prototypes of hybrid vaccine strains were obtained in the work, one of which expresses the hemagglutinin (HA) molecule from the Victoria lineage virus and neuraminidase (NA) from the Yamagata lineage strain (HBNP), and the second expresses HA from the Yamagata lineage virus and NA from the Victoria lineage (HPNB). The engineered viruses possessed the biological properties characteristic of classical strains of type B LAIV. Immunization of mice with vaccine prototypes resulted in the formation of high levels of anti-hemagglutinin antibodies (Abs) to viruses containing the homologous HA antigen. Analysis of the immune response by ELISA to whole viral antigens revealed a high level of cross-reactivity of serum IgG Abs, while the combination of surface antigens in the composition of the hybrid vaccine strains HBNP and HPNB increased the levels of Abs to the virus from which the NA gene was inherited, relative to the classical LAIV strains of the Victoria lineage and the Yamagata lineage, respectively. The presented strategy can be used as a basis for creating a broad-spectrum vaccine against antigenically deleted variants of the influenza B virus.