Детальная информация

Данная дипломная работа посвящена изучению процессов формирования, определения размеров и стабильности инактивированного актина – термодинамически стабильного состояния полипептидной цепи актина, выявленного при исследовании процессов фолдинга и анфолдинга мономерного актина. Актуальность исследования обусловлена тем, что структура инактивированного актина аналогична структуре «коротких олигомеров» ядерного актина, которые накапливаются при различных заболеваниях и следовательно, могут являться мишенью терапевтических воздействий. Цель работы – изучение механизмов формирования инактивированного актина, определения его размеров и стабильности во времени. Для достижения поставленных задач выполнены следующие этапы работы: получение препаратов нативного глобулярного α-актина мышц кролика; индукция инактивации нативного актина путём прогревания образцов при 60°C в течение 30 минут с последующим контролем спектрофлуориметрическими методами; определение размеров нативного и инактивированного актина методом динамического светорассеяния; а также оценка стабильности препаратов во времени. В работе представлены спектры флуоресценции нативных и инактивационных образцов актина, графический анализ корреляционныз функций динамического светорассеяния образцов актина, а также зависимость размеров инактивированного актина от времени. Полученные результаты будут способствовать более глубокому пониманию структурных особенностей ядерного актина в его различных состояниях и могут иметь важное значение для разработки новых методов терапии заболеваний, связанных с нарушением функций этого белка.

This graduation thesis is dedicated to studying the processes of formation, size determination, and stability of inactivated actin – a thermodynamically stable state of the actin polypeptide chain identified during the investigation of folding and unfolding processes of monomeric actin. The relevance of this research is driven by the role of nuclear actin in organizing nuclear space, structuring chromatin, regulating transcription and DNA repair, as well as its potential use in therapeutic applications for various diseases. The aim of the work is to explore the mechanisms of inactivated actin formation and to determine its sizes and stability over time. To achieve these objectives, the following steps were taken: obtaining native globular α-actin preparations from rabbit muscles with purity control via electrophoretic and spectrofluorometric methods; inducing inactivation by heating samples at 60°C for 30 minutes with subsequent spectrofluorometric analysis; measuring the sizes of native and inactivated actin using dynamic light scattering; and assessing the stability of the preparations over time. The work presents fluorescence spectra of native and inactivated samples (11 figures), correlation functions from dynamic light scattering with graphical analysis of the data, and the dependence of inactivated actin sizes on time. The results contribute to a deeper understanding of the structural features of nuclear actin in various states and may be significant for developing new therapeutic approaches for diseases associated with dysfunctions of this protein.