Details

Title: Влияние точечных мутаций в молекуле сигма-1 рецептора на формирование синаптических контактов нейронов стриатума на модели болезни Хантингтона: магистерская диссертация: 16.04.01
Creators: Куканова Екатерина Олеговна
Scientific adviser: Большакова Анастасия Викторовна
Organization: Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого. Институт физики, нанотехнологий и телекоммуникаций
Imprint: Санкт-Петербург, 2016
Collection: Выпускные квалификационные работы; Общая коллекция
Subjects: Белки; Нейроны; болезнь Хантингтона; сигма-1 рецептор; кортико-стриатная культура; дендритные шипики; Huntington's disease; Sigma-1 receptor; cortico-striata culture; dendritic spines
UDC: 577.126(043.3); 616.8-091.81(043.3); 616.851.7(043.3)
Document type: Master graduation qualification work
File type: PDF
Language: Russian
Speciality code (FGOS): 16.04.01
Speciality group (FGOS): 160000 - Физико-технические науки и технологии
DOI: 10.18720/SPBPU/2/v16-2161
Rights: Доступ по паролю из сети Интернет (чтение, печать, копирование)

Allowed Actions:

Action 'Read' will be available if you login or access site from another network Action 'Download' will be available if you login or access site from another network

Group: Anonymous

Network: Internet

Annotation

В работе была изучена роль сигма-1 рецептора в формировании синаптических контактов нейронов стриатума на модели болезни Хантингтона in vitro. Были использованы следующие методы: генотипирование мышей, получение и поддержание кортико-стриатной нейрональной культуры, иммуноцитохимическое окрашивание, конфокальная микроскопия, вирусная трансдукция, Вестерн блот анализ, количественный анализ дендритных шипиков в программе NeuronStudio и экспрессии белков в программе QuantityOne. В работе показано нарушение синаптических контактов между нейронами стриатума и нейронами коры у мышей с мутантным геном хантингтина на 21 день культивирования in vitro по сравнению с 14 днем. Выявлено, что гиперэкспрессия сигма-1 рецептора с сайт-направленными мутациями по 119 и 120 аминокислотам не восстанавливает синаптических контактов в нейронах мышей линии YAC128, в отличие от гиперэкспрессии по 121 и 126 аминокислотам. Можно предположить, что 119 и 120 аминокислоты не играют ключевой роли в активном центре сигма-1 рецепторе, а 121 и 126 аминокислоты имеют важное значение для связывания сигма-1 рецептора с лигандами и белком-партнером. Полученные результаты подтверждают идею о том, что сигма-1 рецептор представляет собой потенциальную мишень для разработки фармакологических препаратов для лечения болезни Хантингтона.

The role of sigma-1 receptor in the formation of synaptic contacts of the striatum neurons on Huntington's disease model in vitro was studied in the present work. The following methods were used: genotyping of mice, isolating and maintaining the cortico-striatal neuronal culture, immunocytochemical staining, confocal microscopy, viral transduction, Western blot analysis, quantitative analysis of dendritic spines in NeuronStudio program and protein expression in QuantityOne program. It was shown a violation of synaptic contacts between striatum neurons and cortex neurons in mice with mutant huntingtin gene on 21 days in vitro culture compared to 14 day. It was revealed that the overexpression of the sigma-1 receptor with site-directed mutations in 119 and 120 amino acids does not restore neuronal synaptic contacts in mice YAC128 as opposed to overexpression with mutations in 121 and 126 amino acids. It is possible to assume that amino acids 119 and 120 do not play a key role in the active center of the sigma-1 receptor and amino acids 121 and 126 are important for the sigma-1 receptor's binding with ligands and the protein-partner. The obtained results confirm the idea that sigma-1 receptor is a potential pharmacological target for development of drugs for the treatment of Huntington's disease.

Document access rights

Network User group Action
ILC SPbPU Local Network All Read Print Download
Internet Authorized users Read Print Download
-> Internet Anonymous

Usage statistics

stat Access count: 392
Last 30 days: 0
Detailed usage statistics