Details

Title: Изучение холодоадаптированного гриппозного вектора со вставкой туберкулезного антигена ESAT6: магистерская диссертация: 16.04.01
Creators: Пулькина Анастасия Александровна
Scientific adviser: Сергеева М. В.
Organization: Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого. Институт физики, нанотехнологий и телекоммуникаций
Imprint: Санкт-Петербург, 2017
Collection: Выпускные квалификационные работы; Общая коллекция
Subjects: грипп; антигены; вакцины; туберкулез
UDC: 616-002.5(043.3); 578.74(043.3)
Document type: Master graduation qualification work
File type: PDF
Language: Russian
Level of education: Master
Speciality code (FGOS): 16.04.01
Speciality group (FGOS): 160000 - Физико-технические науки и технологии
DOI: 10.18720/SPBPU/2/v17-2532
Rights: Доступ по паролю из сети Интернет (чтение, печать, копирование)
Record key: RU\SPSTU\edoc\40191

Allowed Actions:

Action 'Read' will be available if you login or access site from another network Action 'Download' will be available if you login or access site from another network

Group: Anonymous

Network: Internet

Annotation

В рамках работы были сконструированы плазмиды, кодирующие модифицированный ген NS вируса гриппа со вставками протективных антигенов M. tuberculosis. Гены были искусственно синтезированы и клонированы в вектор pHW2006. Полученные плазмиды были трансформированы в бактериальный штамм E.coli DH5α, накоплены и очищены. Методом обратной генетики была проведена сборка нескольких вариантов рекомбинантных вирусов гриппа, различающихся вставками протективных антигенов M. tuberculosis в гене NS. Был проведен отбор штаммов с высокими ростовыми характеристиками путем клонирования вирусов в куриных эмбрионах. С помощью ПЦР со специально подобранных пар праймеров были определены длины гетерологичных вставок в полученных вирусах, которые оказались короче теоретически предсказаных. Методом секвенирования определены нуклеотидные последовательности полученных вариантов. Из полученных клонов был выбран наиболее генетически стабильный штамм с максимально сохранившейся вставкой протективных антигенов M. tuberculosis без сдвига рамки считывания. Методами Вестерн-блот и иммунофлуоресценции была показана экспрессия белка ESAT-6 в выбранном штамме. Показано, что штамм является холодоадаптированным и температурочувствительным. Проведено исследование безопасности и иммуногенности штамма на мышах BALB/c и C57/black. Показано, что штамм является аттенуированным для мышей и стимулирует специфический Т-клеточный ответ к антигенам M. tuberculosis.

Document access rights

Network User group Action
ILC SPbPU Local Network All Read Print Download
Internet Authorized users SPbPU Read Print Download
-> Internet Anonymous

Usage statistics

stat Access count: 306
Last 30 days: 0
Detailed usage statistics