Details

Белок CHD1 – АТФ-зависимый фактор сборки и ремоделирования хроматина, который выполняет ряд важных клеточных функций в хроматине, таких как сборка нуклеосом, обмен гистонов, участие в транскрипции и репликации. Для изучения влияния CHD1 на структуру гетерохроматина была разработана оригинальная методика, позволяющая получить хорошо расправленные политенные хромосомы слюнных желез D. melanogaster для детального анализа исследуемых структур и обеспечивающая наиболее четкую детекцию гистона H1 и белка HP1, являющихся маркерами гетерохроматина, при иммуноокрашивании. В эксперименте участвовали две линии трансгенных мух, сверхэкспрессирующих нативную форму CHD1 и каталитически неактивную форму CHD1. Методом непрямой иммунофлюоресценции было обнаружено, что повышенная экспрессия CHD1 двух трансгенов приводит к разнонаправленным эффектам в структуре хромоцентра: наличию деконденсации гетерохроматиновых областей в случае активной формы CHD1 или отсутствию деконденсации в случае каталитически неактивной формы, но в обоих случаях приводящих к уменьшению гетерохроматина. Также было замечено, что сверхэкспрессия обеих форм CHD1 способствует удалению гистона H1 и белка HP1 из гетерохроматиновых районов хромоцентра. Таким образом, рекрутирование белка HP1 и гистона H1 к гетерохроматиновым последовательностям, скорее всего, регулируется одними и теми же механизмами.