Table | Card | RUSMARC | |
Allowed Actions: –
Action 'Read' will be available if you login or access site from another network
Action 'Download' will be available if you login or access site from another network
Group: Anonymous Network: Internet |
Annotation
Целью работы является получение активного рекомбинантного стрептавидина без использования денатурации и ренатурации получаемого белка. В качестве вектора для экспрессии стрептавидина использовалась плазмида pET22b(+), для наработки бактериальной массы использовались штаммы E.coli BL21(DE3) и BL21(DE3)pLysS. Стрептавидин, полученный с помощью генетической конструкции с PelB-лидерным пептидом, локализируется в различных фракциях E.coli в зависимости от температурного режима индукции синтеза белка IPTG. При температуре индукции 26°С активный стрептавидин локализируется в значимом количестве в культуральной среде. При температуре индукции 16°С активный стрептавидин локализируется в значимом количестве в растворимой фракции клетки. Стрептавидин, полученный с помощью генетической конструкции без pelB-лидерного пептида, в значительном количестве найден в тельцах включения. При использовании штамма продуцента E.coli BL21(DE3)pLysS для синтеза стрептавидина сцепленного с pelB-лидерным пептидом не удалось выделить целевой белок ни из одной клеточной фракции, ни из культуральной среды. Активный стрептавидин использован для получения конъюгатов с пероксидазой хрена.
Document access rights
Network | User group | Action | ||||
---|---|---|---|---|---|---|
ILC SPbPU Local Network | All | |||||
Internet | Authorized users SPbPU | |||||
Internet | Anonymous |
Usage statistics
Access count: 543
Last 30 days: 0 Detailed usage statistics |