Details
Title | Выделение, очистка и поиск условий кристаллизации цитоплазматического домена сигма-1 рецептора человека: выпускная квалификационная работа бакалавра: 16.03.01 - Техническая физика ; 16.03.01_06 - Медицинская и биоинженерная физика |
---|---|
Creators | Болгов Александр Андреевич |
Scientific adviser | Безпрозванный Илья Борисович |
Other creators | Октябрьский Валерий Павлович |
Organization | Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого. Институт биомедицинских систем и биотехнологий |
Imprint | Санкт-Петербург, 2019 |
Collection | Выпускные квалификационные работы ; Общая коллекция |
Subjects | сигма-1 рецептор ; цитоплазматический домен ; гетерологическая экспрессия ; нативный электрофорез ; четвертичная структура ; скрининг условий кристаллизации ; сайт-направленный мутагенез ; sigma-1 receptor ; CTD ; heterologous expression ; CN-PAGE ; quarternery structure ; crystallization screen ; site-directed mutagenesis |
Document type | Bachelor graduation qualification work |
File type | |
Language | Russian |
Level of education | Bachelor |
Speciality code (FGOS) | 16.03.01 |
Speciality group (FGOS) | 160000 - Физико-технические науки и технологии |
Links | Отзыв руководителя ; Отчет о проверке на объем и корректность внешних заимствований |
DOI | 10.18720/SPBPU/3/2019/vr/vr19-2715 |
Rights | Доступ по паролю из сети Интернет (чтение, печать, копирование) |
Record key | ru\spstu\vkr\2757 |
Record create date | 10/4/2019 |
Allowed Actions
–
Action 'Read' will be available if you login or access site from another network
Action 'Download' will be available if you login or access site from another network
Group | Anonymous |
---|---|
Network | Internet |
В работе исследуются условия кристаллизации рекомбинантного цито-плазматического сигма-1 рецептора человека. В ходе работы ген цитоплаз-матического домена сигма-1 рецептора человека был клонирован в бактери-ях E.coli, создана система синтеза и очистки рекомбинантного цитоплазмати-ческого домена сигма-1 рецептора в составе гибридного белка в комплексе с мальтоза-связывающим белком. Методом бесцветного нативного электрофо-реза показано, что раствор исследуемого белка представляет собой полидис-персную смесь олигомеров и мономеров. Разработаны две стратегии реше-ния проблемы полидисперсности: применение детергентов и недетергентных добавок и получение мутантных форм цитоплазматического домена с точеч-ной мутацией в сайте олигомеризации GXXXG.
In this thesis the crystallization screening of the CTD of recombinant hu-man sigma-1 receptor CTD is carried out. The gene of human sigma-1 receptor CTD has been cloned and the CTD fused to MBP by 4 alanine amino acid se-quence has been overexpressed in E. coli bacteria. The downstream process of protein extraction and purification has been optimized. The result of CN-PAGE analysis showed that the protein of interest exists in a solution as a mixture of monomeric and homooligomeric forms. To address this issue, we undertook the studies to convert the CTD of human sigma-1 receptor to the homogenous state. These studies have shown that using different detergents and crystallization addi-tives may be one of the ways to solve this problem. The second way is to design mutant forms of sigma-1 receptor CTD by replacing one of the amino acids in GXXXG oligomerization site.
Network | User group | Action |
---|---|---|
ILC SPbPU Local Network | All |
|
Internet | Authorized users SPbPU |
|
Internet | Anonymous |
|
Access count: 37
Last 30 days: 0