Details

Невирионная РНК-полимераза (нвРНКП) бактериофага phiKZ является неканонической многосубъединичной РНК-полимеразой. НвРНКП состоит из пяти субъединиц, четыре из них являются дальними гомологами каталитических β- и β’- субъединиц бактериальной полимеразы. У пятой субъединицы (Gp68) гомолога с известной функцией найдено не было. Ранее было продемонстрировано, что четырех-субъединичный комплекс (в отсутствии Gp68) не является аналогом бактериального корового фермента. В работе были проведены опыты по сборке 5 субъединичного комплекса in vitro. Было показано, что наличие гексагистидинового хвоста на пятой субъединице не влияет на сборку in vitro пятисубъединичного комплекса нвРНКП, его ДНК-связывающие свойства и активность. Также было продемонстрировано, что C-конец Gp68 принимает участие во взаимодействие с ДНК-субстратом.

A non-virion RNA polymerase (nvRNAP) encoded by a giant bacteriophage phiKZ is a non-canonical multisubunit RNA polymerase. NvRNAP consists of five subunits, four of them are distantly related to catalytic fragments of β- and β ’-subunits of a bacterial polymerase. Homolog with the known function of the fifth subunit (Gp68) was not found. Earlier it was shown that four-subunit nvRNAP (without Gp68) is not an analog of bacterial core enzyme. In this work in vitro experiments on assembly of the five-subunit nvRNAP complex were made. It was shown that existence of polyhistidine-tag on the fifth subunit does not influence on in vitro assembly of five-subunit nvRNAP, its ability to connect to DNA and activity. Also it was shown that the C-terminus of Gp68 takes part in interaction with DNA-substrate.