Details

В данной работе были проведены эксперименты по изменению ДНК как клеток, так и целых эукариотических организмов при помощи CRISPR\Cas систем II класса, а именно системы CRISPR\Cpf1 (Cas12a). В ходе работ использовались плазмидные CRISPR\Cas конструкции, а также РНК-белковые комплексы. Произведено сравнение эффективности геномного редактирования при использовании этих двух подходов по доставке системы в клетки человека. Кроме того, проведено внесение мутаций в рыбах Danio Rerio путем инжекции РНК-белковых комплексов в эмбрионы рыб на стадии одной клетки. В результате получены живые взрослые рыбы с мутациями в гене slc45a2.

In this study, experiments were carried out to change the DNA of both cells and whole eukaryotic organisms using CRISPR\Cas class II systems namely the CRISPR\Cpf1 (Cas12a) system. In the course of the work, plasmid CRISPR\Cas constructions and RNA-protein complexes were used. A comparison was made of the effectiveness of genomic editing using these two approaches of delivery of the system to human cells. In addition, mutations were made in Danio Rerio by injecting RNA-protein complexes into fish embryos at the single cell stage. As a result, live adult fish with mutations in the slc45a2 gene were obtained.