Данная работа посвящена выявлению молекулярных механизмов, обуславливающих функциональные и метаболические изменения в скелетной мускулатуре при активации цАМФ-зависимого сигнального пути с помощью IBMX. В ходе выполнения работы были использованы следующие методы: культивирование клеточной линии С2С12, миогенная дифференцировка с помощью «голодной среды» (HS) и IBMX (неселективный ингибитор фосфодиэстераз), иммуноцитохимическое окрашивание, ПЦР в режиме реального времени, вестерн-блоттинг, исследование биоэнергетики полученных миотрубок с использованием технологии Seahorse. В результате выполнения работы было выявлено, что активация цАМФ-зависимого пути индуцирует миогенную дифференцировку и слияние миобластов, но при этом фенотип полученных мышечных трубок отличается от HS-миотрубок. Воздействие IBMX на клеточную культуру С2С12 приводит к изменению уровня экспрессии факторов, регулирующие миогенез, мышечных миозинов, промежуточных филаментов и генов, регулирующих слияние митохондрий. Анализ клеточного метаболизма выявил снижение общего метаболического потенциала в IBMX-индуцированных мышечных трубках.

This work is devoted to the identification of molecular mechanisms that determine functional and metabolic changes in skeletal muscles during activation of a cAMP-dependent signaling pathway using IBMX. In the given work the following methods were used: the C2C12 cell line cultivation, myogenic differentiation using a “Horse serum” (HS) and IBMX (non-selective inhibitor of phosphodiesterases), immunocytochemical staining, real-time PCR, Western Blotting, cellular bioenergetics analysis using Seahorse technology. As a result of the work, it was revealed that activation of the cAMP-dependent pathway induces myogenic differentiation and fusion of myoblasts. But phenotype of these myotubes was different from HS-induced myotubes. The effect of IBMX on C2C12 cells leads to changes in the gene expression of factors that regulate myogenesis. Also, it affects the myosin expression, intermediate filaments, and genes that regulate mitochondrial fusion. Analysis of cell metabolism revealed a decrease metabolic potential in IBMX-induced muscle tubes.