Details

Title: Кинетика репарации двунитевых разрывов у хроматинремоделирующих мутантов dr. Melanogaster in vivo: выпускная квалификационная работа магистра: направление 16.04.01 «Техническая физика» ; образовательная программа 16.04.01_13 «Медицинская физика»
Creators: Украинцев Владислав Юрьевич
Scientific adviser: Богомаз Денис Игоревич
Other creators: Октябрьский Валерий Павлович
Organization: Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого. Институт биомедицинских систем и биотехнологий
Imprint: Санкт-Петербург, 2020
Collection: Выпускные квалификационные работы; Общая коллекция
Subjects: репарация ДНК; Drosophila; мозг; радиационно-индуцированные разрывы; повреждения ДНК; ионизирующее излучение; хроматин; DNA repair; double-strand breaks; brain; radiation-induced breaks; DNA damage; ionizing radiation; ToRC complex
Document type: Master graduation qualification work
File type: PDF
Language: Russian
Level of education: Master
Speciality code (FGOS): 16.04.01
Speciality group (FGOS): 160000 - Физико-технические науки и технологии
Links: Отзыв руководителя; Рецензия; Отчет о проверке на объем и корректность внешних заимствований
DOI: 10.18720/SPBPU/3/2020/vr/vr20-1786
Rights: Доступ по паролю из сети Интернет (чтение, печать, копирование)
Record key: ru\spstu\vkr\9218

Allowed Actions:

Action 'Read' will be available if you login or access site from another network Action 'Download' will be available if you login or access site from another network

Group: Anonymous

Network: Internet

Annotation

Данная работа посвящена исследованиям в области репарации ДНК Способность клеток исправлять повреждения ДНК - основа сохранения целостности и нормального функционирования генома. В настоящее время интерес к ДНК-репарации обусловлен ее связью с канцерогенезом и необходимостью разработки таргетных лекарственных препаратов. Целью данной работы является изучение кинетики репарации радиоционно-индуцированных двунитевых разрывов (ДР) ДНК in vivo в мозге дрозофилы. Используются генетические конструкции, кодирующие слитый с желтым флуоресцентным белком (YFP) белок MU2, для которого показана ко-локализация с сигнализирующим о прохождении репарации модифицированным гистоном γH2Av после облучения. Визуализация кинетики репарации в реальном времени in vivo у Dr. melanogaster производится методами конфокальной микроскопии. Впервые в мире разработана методика для анализа кинетики репарации радиационно-индуцированных повреждений в реальном времени в живой ткани сложного многоклеточного организма – Drosophila melanogaster. Проанализирована кинетика репарации ДР ДНК в сохраняющем свою жизнеспособность мозге поздней личинки дрозофилы. Среднее время исчезновения сигнала MU2–YFP составило 90 минут для одного разрыва. Обнаружены различия в появлении сигналов, характеризующих репаративное событие, в митотически активных стволовых клетках - вторичных нейробластах и дифференцированных клетках. Обнаружено, что время репарации зависит от количества сайтов, в которых происходит репарация двойного разрыва в данном ядре. При этом и появление, и исчезновение нескольких сигналов, показывающих осуществление процессов репарации ДР ДНК происходит одновременно во всех сайтах ядра. Синтезированы линии дрозофилы, необходимые для анализа роли хроматинремоделирующего фактора Tou в репарации ДР ДНК по разработанной методике.

The ability of cells to repair DNA damage is the basis for maintaining of the genome integrity and functions. Recently an interest to DNA repair is greatly increased due to its role in cancerogenesis and the need to develop targeted drugs. This work is devoted to the studies of DNA repair. The aim of this work is to study the kinetics of the radiation-induced double-stranded DNA breaks (DSB) repair in vivo in Drosophila brain. The genetic constructs encoding the MU2 pro-tein fused with YFP were used. Drosophila MU2 protein recognizes the γH2Av, a histone mark of DSB repair process. MU2 protein is an ortholog of human's MDC1, which interacts with a variant histone H2Ax, phosphorylated by Ser13 (γH2Ax). In vivo repair process of DSB is visualized in real-time by confocal mi-croscopy. Using of fluorescent proteins makes it possible to study the individual components in living tissues. For the first time a technique has been developed to analyze the kinetics of radiation-induced breaks repair in real time in the living tissue of a complex multi-cellular organism - Drosophila melanogaster. The kinetics of DSB DNA repair in the isolated viable brain of the Drosophila late larva was analyzed. The average time of MU2-YFP signal disappearance is 90 minutes for one gap. We observed the differences in appearance of the signals of the reparative event in mitotic active stem cells - secondary neuroblasts and in differentiated cells. We have found that the time required for DSB repair depends on the number of DSB sites per cell. Analysis of the appearance and disappearance of several signals shows that DSB DNA repair processes occurs simultaneously in all sites of the nucleus. Drosophila lines, required for the analysis of the role of chromatin remodeling factor Tou in DNA repair have been synthesized.

Document access rights

Network User group Action
ILC SPbPU Local Network All Read Print Download
External organizations N2 All Read
External organizations N1 All
Internet Authorized users SPbPU Read Print Download
Internet Authorized users (not from SPbPU, N2) Read
Internet Authorized users (not from SPbPU, N1)
-> Internet Anonymous

Usage statistics

stat Access count: 6
Last 30 days: 0
Detailed usage statistics