Дипломная работа «Влияние амброксола на ферментативную активность глюкоцереброзидазы на первичной культуре макрофагов» посвящена оценке влияния фармакологического шаперона (ФШ) амброксола на изменение активности фермента глюкоцереброзидазы (GCase) и уровня лизосфинголипида гексозилсфинголиза (HexSph) в сухих пятнах макрофагов периферической крови пациентов с болезнью Паркинсона, ассоциированной с мутациями в гене GBA (GBA-БП). В ходе работы было проведено культивирование макрофагов периферической крови пациентов с GBA-БП, а также неврлогически здоровых индивидуумов (контроль) в присутствии и без амброксола, с последующим формированием банка сухих пятен макрофагов всех индивидуумов, вошедших в исследование, для дальнейшей оценки активности GCase и концентрации HexSph методом ВЭЖХ МС/МС. Дипломная работа выполнена на базе лаборатории молекулярной генетики человека НИЦ «Курчатовский институт» - ПИЯФ. В ходе данной работы было показано, что макрофаги периферической крови человека являются хорошей моделью для оценки изменения активности GCase и концентрации ее субстрата при воздействии на них лекарственными препаратами. Впервые показано, что амброксол эффективно восстанавливает активность GCase и снижает концентрацию HexSph в макрофагах периферической крови пациентов с GBA-БП, что показывает потенциальную возможность использования данного ФШ в терапии GBA-БП. При выполнении дипломной работы были проведены следующие эксперименты: культивирование макрофагов периферической крови в присутствии и без ФШ амброксола, оценка фенотипического созревания макрофагов, оценка выживаемости макрофагов при добавлении различной концентрации ФШ амброксола, оценка активности GCase и концентрации HexSph в сухих пятнах макрофагов, статистическая обработка данных.

The gradient work "Ambroxol influence on the enzymatic glucocerebrosidase activity in primary macrophage culture" is devoted to evaluating the effect of pharmacological chaperone (FSH) Ambroxol on changes in the activity of the glucocerebrosidase enzyme (GCase) and the level of lysosphingolipid hexosylsphingolysis (HexSph) in dry macrophage spots in the peripheral blood of patients with Parkinson's disease associated with mutations in the GBA gene (GBA-BP). In the course of the work, peripheral blood macrophages were cultured in patients with GBA-BP, as well as in neurologically healthy individuals (control) in the presence and without Ambroxol, followed by the formation a Bank of dry macrophage spots in all individuals included in the study for further evaluation of GCase activity and HexSph concentration by HPLC MS/MS. The graduate work was performed on the basis of the laboratory of human molecular genetics of the Kurchatov Institute - PNPI. In the course of this work, it was shown that human peripheral blood macrophages are a good model for evaluating changes in GCase activity and the concentration of its substrate when exposed to drugs for drug testing. For the first time, Ambroxol was shown to effectively restore GCase activity and reduce HexSph concentration in peripheral blood macrophages of patients with GBA-BP, which shows the potential use of this FSH in GBA-BP therapy. The following experiments were performed during the graduate work: cultivation of peripheral blood macrophages in the presence and without FSH Ambroxol, phenotypic characterization of monocytes and macrophages, quantify macrophages survival, assessment of GCase activity and HexSph concentration in dry macrophage spots, statistical analysis.

• b67e6fca3f3163505383883c9d956eef30ff1bbf8f5a159b3b01550bccd29ce9.pdf
• b67e6fca3f3163505383883c9d956eef30ff1bbf8f5a159b3b01550bccd29ce9.pdf
• b67e6fca3f3163505383883c9d956eef30ff1bbf8f5a159b3b01550bccd29ce9.pdf