Детальная информация

Название: Характеризация нуклеазы PpCas9 из бактерии Pasteurella pneumotropica in vitro и ее применение для праймированного редактирования ДНК: выпускная квалификационная работа магистра: направление 16.04.01 «Техническая физика» ; образовательная программа 16.04.01_10 «Медицинская биотехнология»
Авторы: Казалов Максим Алексеевич
Научный руководитель: Ходорковский Михаил Алексеевич
Другие авторы: Октябрьский Валерий Павлович; Федорова Яна Витальевна
Организация: Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого. Институт биомедицинских систем и биотехнологий
Выходные сведения: Санкт-Петербург, 2021
Коллекция: Выпускные квалификационные работы; Общая коллекция
Тематика: Молекулярная биология; Белки; Бактерии; редактирование генома; праймированное редактирование; genome editing; prime editing
УДК: 577.2; 577.112; 578.81; 579
Тип документа: Выпускная квалификационная работа магистра
Тип файла: PDF
Язык: Русский
Уровень высшего образования: Магистратура
Код специальности ФГОС: 16.04.01
Группа специальностей ФГОС: 160000 - Физико-технические науки и технологии
Ссылки: Отзыв руководителя; Рецензия; Отчет о проверке на объем и корректность внешних заимствований
DOI: 10.18720/SPBPU/3/2021/vr/vr21-1902
Права доступа: Доступ по паролю из сети Интернет (чтение, печать, копирование)
Ключ записи: ru\spstu\vkr\15193

Разрешенные действия:

Действие 'Прочитать' будет доступно, если вы выполните вход в систему или будете работать с сайтом на компьютере в другой сети Действие 'Загрузить' будет доступно, если вы выполните вход в систему или будете работать с сайтом на компьютере в другой сети

Группа: Анонимные пользователи

Сеть: Интернет

Аннотация

В данной работе была проведена характеризация нуклеазы PpCas9 из бактерии Pasteurella pneumotropica путем проведения экспериментов in vitro. Результаты работ показали активность PpCas9 в разрезании ДНК in vitro. В ходе работ были определены температурный диапазон работы нуклеазы PpCas9, паттерн разрезания ею ДНК-мишеней и требования нуклеазы к РАМ-последовательности (5’-NNNNRT-3’). Также нами была создана форма PpCas9, никирующая ДНК. Охарактеризованный в данной работе белок PpCas9 был использован для создания системы праймированного редактирования генома эукариот, однако созданная система не продемонстрировала эффективности в точном редактировании ДНК клеток человека.

In this work, we characterized PpCas9 nuclease from Pasteurella pneumo-tropica by in vitro experiments. The results of the work showed that PpCas9 is ac-tive in vitro and can introduce double stranded breaks in DNA. In addition, we de-termined the temperature requirements for the PpCas9 nuclease activity, the pattern of PpCas9 DNA cleavage and the requirements for the PAM sequence (5'-NNNNRT-3 ') in vitro. Also we created a PpCas9 mutant form, which nicks DNA. The PpCas9 protein characterized in this work was used to create a system for Prime editing of eukaryotic genome. Unfortunately the created system did not demonstrate the efficient precise editing of genomic DNA in human cells.

Права на использование объекта хранения

Место доступа Группа пользователей Действие
Локальная сеть ИБК СПбПУ Все Прочитать Печать Загрузить
Внешние организации №2 Все Прочитать
Внешние организации №1 Все
Интернет Авторизованные пользователи СПбПУ Прочитать Печать Загрузить
Интернет Авторизованные пользователи (не СПбПУ, №2) Прочитать
Интернет Авторизованные пользователи (не СПбПУ, №1)
-> Интернет Анонимные пользователи

Статистика использования

stat Количество обращений: 1
За последние 30 дней: 0
Подробная статистика