Данная работа посвящена исследованию ростостимулирующей активности коллекционных штаммов микроорганизмов, составлению питательных сред и подбору условий культивирования в лабораторном ферментере. Задачи, которые решались в ходе исследования: - изучить ростостимулирующую активность коллекционных штаммов микроорганизмов (коллекция ВНИИСХМ) и отобрать наиболее перспективный штамм; - составить питательные среды для культивирования наиболее перспективного штамма на основе доступных и технологичных компонентов; - предложить рекомендации для разработки технологического режима выращивания культуры в лабораторном биореакторе. Объект исследования – штаммы коллекционных и перспективных выделенных микроорганизмов, включая Pseudomonas species шт. ПГ-5, 2П-5, 2П-7, О-12, 2П-9, Я-2, 2П-12, пшеница яровая сорт Сударыня, свекла овощная сорт Детройт. Работа выполнена на базе лаборатории биотехнологического производства «Экос Биопрепараты». Анализируемыми показателями ростостимулирующей активности штаммов микроорганизмов были – всхожесть семян, длина корешков проростков, титры культивирования на питательных средах. В ходе исследований показано, что наибольшую ростостимулирующую активность в отношении пшеницы показали штаммы О-12 и Я-2, в отношении свеклы - штамм О-12. Отобранный штамм Pseudomonas sp. О-12 наиболее отзывчив на внесение дополнительных количеств трегалозы и маннита в питательные среды. При выращивании данного штамма методом глубинного культивирования на полусинтетической питательной среде с добавлением трегалозы изменение скорости мешалки не увеличивает производительность процесса спустя 72 часа после начала культивирования.

This work is devoted to the study of the growth-stimulating activity of collection strains of microorganisms, the preparation of nutrient media and the selection of cultivation conditions in a laboratory fermenter. The tasks of the study: - to study the growth-stimulating activity of collection strains of microorganisms (VNIISKhM collection) and select the most promising strain; - compose nutrient media for the cultivation of the most promising strain based on available and technological components; - to offer recommendations for the development of a technological regime for growing a culture in a laboratory bioreactor. The object of the study is strains of collection and promising isolated microorganisms, including Pseudomonas species pcs. PG-5, 2P-5, 2P-7, O-12, 2P-9, I-2, 2P-12, spring wheat variety Sudarynya, beetroot vegetable variety Detroit. The work was carried out on the basis of the laboratory of biotechnological production "Ecos Biopreparations". The analyzed indicators of the growth-stimulating activity of microorganism strains were seed germination, seedling root length, cultivation titers on nutrient media. In the course of the research, it was shown that strains O-12 and Ya-2 showed the greatest growth-stimulating activity in relation to wheat, and strain O-12 in relation to beets. The selected strain of Pseudomonas sp. O-12 is most responsive to the addition of additional amounts of trehalose and mannitol to nutrient media. When growing this strain by submerged cultivation on a semi-synthetic nutrient medium with the addition of trehalose, changing the stirrer speed does not increase the productivity of the process 72 hours after the start of cultivation.

• 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
• 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
• 2.1. Материалы исследований
• 2.2.1. Методы определения ростостимулирующей активности у бактерий
• 2.2.3. Методы приготовления фиксированного мазка и микроскопии
• По прошествии 7 суток при 180 об. /мин и температуре 28 C колбы снимались. Каждый образец с содержимым ставили в ламинар, готовили горелку и микробиологическую петлю. Петлю прожигали в пламени горелки до покраснения. Затем вращательным движением выни...
• Рисунок 2.11 – Фиксированный мазок, окрашенный метиленовым синем
• 2.2.4. Методы определения титров бактериальных культур
• 2.2.5. Методы определения параметров культивирования наиболее перспективного штамма в лабораторном ферментере
• 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВНАИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
• 3.1. Результаты определения ростостимулирующей активности у бактерий
• 3.2. Результаты подбора компонентов питательных сред для выращивания Pseudomonas
• После приготовления бактериальных культур были приготовлены фиксированные мазки, окрашенные метиленовым синем. Каждый образец микроскопировался (рис. 3.5–3.8).
• 3.3. Результаты определения параметров культивирования наиболее перспективного штамма в лабораторном ферментере
  • Таблица 4.2 – Способы защиты от вредных/опасных факторов
  • Таблица 4.3 – Санитарное состояние помещений
  • Таблица 4.4 – Нормы выдачи специальной одежды, обуви, СИЗ
• ЗАКЛЮЧЕНИЕ
• Был проведен скрининг ряда коллекционных штаммов (коллекция ВНИИСХМ) на предмет их ростостимулирующей активности. Среди наиболее перспективных штаммов выделен штамм О-12, были изучены его культуральные признаки и потребность в различных факторах роста...
• По результатам выполнения работы был сделан ряд следующих выводов:
• 1. Среди штаммов Pseudomonas sp. ПГ-5, 2П-5, 2П-7, О-12, 2П-9, Я-2, 2П-12 наибольшую ростостимулирующую активность в отношении пшеницы показали штаммы О-12 и Я-2, в отношении свеклы - штамм О-12.
• 2. Отобранный штамм Pseudomonas sp. О-12 наиболее отзывчив на внесение дополнительных количеств трегалозы и маннита в питательные среды.
• 3. При выращивании данного штамма методом глубинного культивирования на полусинтетической питательной среде №3 с добавлением трегалозы изменение скорости вращения мешалки не увеличивает производительность процесса спустя 72 часа после начала культивир...
• Шепель Е.К.
• «27» мая 2022 г.