Данная работа посвящена выявлению патологического фенотипа болезни Гентингтона на клеточном уровне при исследовании первичных дермальных фибробластов больных. В работе использованы методы культивирования клеток первичных дермальных фибробластов человека, иммунофлуоресцентное окрашивание, вестерн-блоттинг. В этом исследовании мы успешно визуализировали Htt с помощью иммунофлуоресцентного окрашивания PolyQ, которое показало незначительное увеличение уровня PolyQ в фибробластах пациентов с БХ по сравнению с фибробластами здоровых доноров. Повышение уровня окисленного 8-гидрокси-2-дезоксигуанозина (8-OHDG) не наблюдалось в фибробластах больных БХ по сравнению с фибробластами здоровых доноров. Анализ показал более высокие уровни GRP75 в здоровых фибробластах, чем в фибробластах HD, с почти значимыми данными и снижением уровней S1R, что может указывать на нарушение регуляции сигнальных путей Ca2+. Результаты исследования проливают свет на изменения окислительного стресса и белковые контакты между ЭР и митохондриями при БХ, что может способствовать лучшему пониманию механизмов заболевания и мишеней для потенциальных лекарств.

The given work is devoted Detection of the pathological phenotype of Huntingtons disease at the cellular level in the study of primary dermal fibroblasts of patients. The methods used in this work are cell culturing of primary human dermal fibroblasts, immunofluorescent staining, western blotting. In this study, we successfully visualized Htt through PolyQ immunofluorescence staining which showed non-significant increase in PolyQ level in HD patients’ fibroblasts comparing to healthy donors’ fibroblasts. Increased levels of oxidized 8-hydroxy-2-deoxyguanosine (8-OHDG) were not observed in fibroblasts from HD patients compared to fibroblasts from healthy donors. Analysis showed higher levels of GRP75 in healthy fibroblasts than HD fibroblasts with almost significant data and decrease of S1R levels which may mark impaired Ca2+  signaling pathways dysregulation. The results of the study shed light on oxidative stress changes and protein contacts between ER and mitochondria in HD which may contribute to better understanding of the disease mechanisms and targets for potential drugs.