Дипломная работа «Нарушение аутофагии у пациентов с GBA-ассоциированной болезнью Паркинсона и у бессимптомных носителей мутаций в гене GBA» посвящена исследованию влияния мутаций в гене GBA на аутофагию, активность фермента глюкоцереброзидазы (GCase) и уровень лизосфинголипида гексозилсфингозина (HexSph) в макрофагах и периферической крови у пациентов с GBA-ассоциированной болезнью Паркинсона (GBA-БП) и у бессимптомных носителей мутаций гена GBA (GBA-носителей). В ходе работы было проведено культивирование макрофагов периферической крови пациентов с GBA-БП, GBA-носителей, а также неврологически здоровых индивидуумов (контроль), проведена оценка степени аутофагии и измерена ферментативная активность GCase и концентрация лизосфинголипида HexSph в периферической крови и первичной культуре макрофагов методом комбинированной высокоэффективной жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ВЭЖХ МС/МС). Дипломная работа выполнена на базе лаборатории молекулярной генетики человека НИЦ «Курчатовский институт» - ПИЯФ. В ходе данной работы было показано, что мутации в гене GBA ассоциированы с нарушением аутофагии, как у пациентов с GBA-БП, так и у GBA-носителей. Для GBA-носителей это показано впервые. Кроме того, было продемонстрировано, что активность GCase обратно коррелирует с нарушением аутофагии в первичной культуре макрофагов носителей мутаций в гене GBA независимо от статуса болезни Паркинсона. При выполнении дипломной работы были проведены следующие эксперименты: культивирование макрофагов периферической крови, оценка фенотипического созревания макрофагов, оценка степени аутофагии в макрофагах периферической крови, оценка активности GCase и концентрации HexSph в макрофагах и периферической крови методом ВЭЖХ МС/МС, статистическая обработка данных.

The master's degree work "Disturbance of autophagy in patients with GBA-associated Parkinson's disease and asymptomatic carriers of mutations in the GBA gene" is devoted to the study of the effect of mutations in the GBA gene on autophagy, the activity of the enzyme glucocerebrosidase (GCase) and the level of lysosphingolipid hexosylsphingosine (HexSph) in macrophages and peripheral blood in patients with GBA-associated Parkinson's disease (GBA-PD) and in asymptomatic carriers of GBA gene mutations (GBA carriers). In the course of the work, peripheral blood macrophages were cultured in patients with GBA-PD, GBA carriers, as well as neurologically healthy individuals (control), the degree of autophagy was assessed and the enzymatic activity of GCase and HexSph concentration in peripheral blood and primary macrophage culture were measured by combined high-performance liquid chromatography-mass spectrometry (HPLC MS/MS). The master's degree work was carried out on the basis of the laboratory of human molecular genetics of the Petersburg Nuclear Physics Institute (PNPI) named by B.P.Konstantinov of NRC «Kurchatov Institute». In the course of this work, it was shown that mutations in the GBA gene are associated with a disturbance of autophagy, both in patients with GBA-PD and in GBA carriers. This is shown for the first time for GBA carriers. It has been demonstrated that GCase activity is inversely correlated with autophagy disturbance in the primary macrophages culture of carriers of mutations in the GBA gene, regardless of the status of Parkinson's disease. When completing the master's degree work, the following experiments were carried out: cultivation of peripheral blood macrophages, assessment of phenotypic maturation of macrophages, assessment of the degree of autophagy in peripheral blood macrophages, assessment of GCase activity and HexSph concentration in macrophages and peripheral blood by HPLC MS/MS, statistical data processing.