Details

Данная работа посвящена изучению степени глобального метилирования геномной ДНК общей лейкоцитарной фракции и CD45+ клеток периферической крови, а также оценке уровня альфа-синуклеина в CD45+ клетках крови как потенциального биомаркера БП. Для исследования были собраны образцы крови лиц контрольной группы и группы пациентов с БП, не принимающих Л-ДОФА-содержащие препараты, поскольку последние могут влиять на уровень метилирования геномной ДНК. CD45+ клетки выделяли из периферической крови центрифугированием в градиенте плотности раствора фиколла с последующей магнитной сепарацией. Выделение ДНК осуществлялось методом фенол-хлороформной экстракции из образцов цельной крови и CD45+ клеток. Оценка уровня белка альфа-синуклеина в лизатах CD45+ клеток и уровня глобального метилирования ДНК периферической крови проводились методом иммуноферментного анализа. В ходе данного исследования было установлено, что БП характеризуется снижением уровня метилирования геномной ДНК общей фракции лейкоцитов периферической крови пациентов. Показано, что БП сопровождается повышением уровня альфа-синуклеина в CD45+ клетках периферической крови пациентов.  Установлено, что с возрастом у пациентов с БП увеличивается уровень метилирования геномной ДНК в CD45+ клетках периферической крови. В то же время не было обнаружено корреляции уровня альфа-синуклеина с уровнем метилирования в группе пациентов с БП и среди лиц контрольной группы. Полученные данные свидетельствуют о том, что метилирование геномной ДНК в ОФЛ, а также повышение уровня SNCA в CD45+ клетках периферической крови могут выступать в качестве потенциальных маркеров развития БП.

In this study, we aim to investigate the level of methylation of genomic DNA within the total leukocyte population and CD45+ cells in peripheral blood samples from patients with PD, as well as assess the level of alpha-synuclein expression in these cells as a potential biomarker for PD. For the study, blood samples were collected from individuals in the control group and a group of patients with PD who did not take L-DOPA-containing medications, as these drugs can affect the methylation of genomic DNA. CD45+ cells were isolated from peripheral blood using a density gradient centrifugation method followed by magnetic separation in a ficoll solution. DNA was extracted from whole blood samples and CD45+ cells using a phenol-chloroform method. The level of alpha-synuclein protein in CD45+ cell lysates and the level of global DNA methylation in peripheral blood were evaluated by enzyme immunoassay. We found that Parkinsons disease is characterized by a decrease in the level of genomic DNA methylation in the total leukocyte fraction of peripheral blood in patients. This may be due to an increase in the level of α-synuclein in CD45+ cells in the peripheral blood of PD patients. We also found that there was no correlation between the level of alpha-synuclein and the level of methylation in the group of patients with PD and among the control group. However, there was no correlation between the levels of α-synuclein and methylation in PD patients and in the control group. The data suggest that genomic DNA methylation and an increase in α-synuclein levels in CD45+ peripheral blood cells may act as potential biomarkers for PD development.