Details

Данная работа посвящена оптимизации проведения мультиплексной ПЦР на микрофлюидном чипе. Для достижения данной цели была разработана независимая управляющая плата термоциклера, на экспериментальном стенде была проведена серия экспериментов для проверки корректности протекания ПЦР, результаты сравнивали с данными анализатора нуклеиновых кислот АНК-32 на основе ПЦР-РВ, разработки ИАП РАН. Также была проведена серия экспериментов для подбора оптимального температурного режима реакции. В процессе оптимизации были рассмотрены температуры отжига в 96, 94, 92 и 90 °С. При проведении ПЦР на термоциклере были получены данные, которые подтверждают возможность снижения температуры отжига до 92 °С, дальнейшее снижение температуры отжига приводило к снижению эффективности метода. На данный момент на рынке не существует готовых решений для управления процессом термоциклирования. В этой ВКР была подтверждена работоспособность экспериментального стенда, собранного на основе спроектированной платы. Были решены задачи стабилизации тока и автоматизации контроля температурных режимов. Данный проект может быть успешно масштабирован и применен в других проектах, требующих точного и стабильного термоконтроля.

This given work is devoted to optimizing multiplex PCR on a microfluidic chip. To achieve this goal was developed an independent control board of the thermocycler. Also, a series of experiments were conducted on the experimental stand to verify the correctness of PCR, the results were compared with the data of the ANK-32 nucleic acid analyzer based on PCR-RT, developed by IAP RAS. A series of experiments was carried out to select the optimal temperature regime for the reaction. During the optimization process, annealing temperatures of 96, 94, 92 and 90 °C were examined. During PCR on a thermocycler, data was obtained that confirmed the possibility of reducing the annealing temperature to 92 ° C, a further decrease in the annealing temperature led to a decrease in the effectiveness of the method. At the moment, there are no completed solutions on the market for controlling the thermocycling process. In this study, the operability of experimental stand assembled on the basis of the designed board was confirmed. The problem of current stabilization and automation of temperature control were solved. This project can be successfully scaled and applied in other projects that require accurate and stable thermal control.