Details

Данная работа посвящена определению влияния CRISPR-интерференции на экспрессию генов ftsA и ftsZ в M. gallisepticum. Задачи, которые решались в ходе исследования: 1. Разработать протокол пробоподготовки, позволяющий получать культуры различных штаммов M. gallisepticum, находящихся в одинаковой фазе роста; 2. Выделить тотальную РНК из полученных культур; 3. Получить кДНК на основе выделенной тотальной РНК; 4. Сравнить уровни экспрессии генов ftsA и ftsZ в различных штаммах M. gallisepticum, включая штаммы с CRISPR-интерференцией, при помощи ПЦР в реальном времени; Работа была выполнена на базе Научно-исследовательского комплекса «Нанобиотехнологии» Санкт-Петербургского политехнического университета Петра Великого. Объектом исследования данной работы являются различные штаммы бактерии M. gallisepticum. В ходе исследования было показано, что в исследуемых штаммах CRISPR-интерференция позволила снизить уровень экспрессии гена ftsA. В то же время CRISPR-интерференция не позволила снизить уровень экспрессии гена ftsZ.

This work is devoted to determining the effect of CRISPR interference on the expression of the ftsA and ftsZ genes in M. gallisepticum. Tasks that were solved during the research: 1. To develop a sample preparation protocol that allows to obtain cultures of different M. gallisepticum strains in the same growth phase; 2. To isolate total RNA from the obtained cultures; 3. To obtain cDNA based on isolated total RNA; 4. To compare the expression levels of the FtsA and FtsZ genes in various M. gallisepticum strains, including strains with CRISPR interference, using real-time PCR; The work was carried out on the basis of the scientific research complex "Nanobiotechnology" of Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University. The object of the study of this work are various strains of the bacterium M. gallisepticum strains. During the study, it was shown that in the studied strains, CRISPR interference allowed to reduce the expression level of the ftsA gene. At the same time, CRISPR interference did not reduce the expression level of the ftsZ gene.