С-реактивный белок (СРБ) является биологическим маркером воспаления. Определение концентрации СРБ позволяет дифференцировать бактериальную этиологию от вирусной инфекции, определять риск развития сердечно-сосудистых заболеваний и диагностировать воспалительные процессы организма человека. Получение СРБ в прокариотических системах экспрессии позволит сделать более быстрой и доступной разработку диагностических тест-систем, использующих СРБ. Данная работа посвящена получению экспрессионного штамма E. coli BL21(DE3) с оригинальной генетической конструкцией на основе плазмидного вектора pQE, кодирующей ген crp человека, и оптимизации условий индукции экспрессии белка. В рамках данной работы был выполнен дизайн оригинальной генетической конструкции на основе экспрессионного вектора pQE, кодирующей ген crp человека, методом «Nested» ПЦР была получена последовательность гена crp человека. Были получены штаммы-продуценты E. coli DH5α и E. coli BL21(DE3), на основе экспрессионного вектора pQE, кодирующего ген crp человека. В полученном штамме-продуценте E. coli BL21(DE3)_pQE-CRP были оптимизированы условия индукция экспрессии СРБ. Изменение концентрации индуктора, а также смена температурного режима культивирования клеточного штамма не стали решающими факторами при синтезе целевого белка. Нарабатываемый рекомбинантный белок находится в нерастворимом виде, о чём свидетельствует анализ субклеточной локализации.

C-reactive protein (CRP) is a biological marker of inflammation. Determination of CRP concentration allows differentiating bacterial etiology from viral infection, determining the risk of cardiovascular diseases and diagnosing inflammatory processes of the human body. Production of recombinant CRP in prokaryotic expression systems will make the development of diagnostic test systems utilizing CRP more rapid and affordable. This work is devoted to obtaining an expression strain of E. coli BL21(DE3) with an original genetic construct based on the plasmid vector pQE containing the human crp gene and optimizing the conditions of protein expression. In this work, the design of the original genetic construct based on the expression vector pQE encoding the human crp gene was carried out, and the sequence of the human crp gene was obtained using “Nested” PCR. E. coli DH5α and E. coli BL21(DE3) strains-producers were obtained based on the expression vector pQE containing the human crp gene. In the resulting E. coli BL21(DE3)_pQE-CRP producer strain, the conditions for induction of CRP expression were optimized. Changing the inducer concentration as well as changing the temperature regime of cell strain cultivation did not become decisive factors in synthesizing the target protein. The produced recombinant protein is in insoluble form, as evidenced by the analysis of subcellular localization.