Details

Данная работа посвящена оптимизации методов прижизненного окрашивания клеток морской звезды Asterias rubens для изучения процессов восстановления популяции целомоцитов. Цель работы —подбор оптимальных условий для прижизненного окрашивания клеток морской звезды Asterias rubens с целью последующего наблюдения за клетками, участвующими в процессе восстановления популяции целомоцитов. Используя методы прижизненного окрашивания клеток ядерным красителем Hoechst 33342 с последующим наблюдением на микроскопе, в экспериментах in vivo были подобранны эффективные концентрации, для дальнейшего эксперимента in vitro, проведенного для наблюдения взаимодействия целомоцитов, полученных от разных особей. Результаты показали, что клетки окрашиваются равномерно, окрашивание во всех тканях и органах выявлялось до 4 дней, что подтвердило низкую цитотоксичность Hoechst 33342 и его пригодность для долгосрочных экспериментов. Эксперименты in vitro показали, что для анализа взаимодействия клеток предпочтительно комбинированное окрашивание (Hoechst + CellMask™) и отсутствие субстратов. Основным выводом работы стало отсутствие клоттинг реакции между целомоцитами, полученными от разных особей.

This work is dedicated to the optimization of methods for vital staining of Asterias rubens sea star cells to study the processes of the coelomocyte population replenishment. The aim of the work is to identify optimal conditions for vital staining of Asterias rubens sea star cells to enable subsequent observation of cells involved in the process of coelomocyte population recovery. Using vital cell staining methods with the nuclear dye Hoechst 33342 followed by microscopic observation in vivo experiments, effective concentrations were selected. These were used in a subsequent in vitro experiment conducted to observe interactions between coelomocytes obtained from different individuals. The results showed that the cells stain uniformly, with staining detectable in all tissues and organs for up to 4 days, confirming the low cytotoxicity of Hoechst 33342 and its suitability for long-term experiments. The in vitro experiments demonstrated that for analyzing cell interactions, combined staining (Hoechst + CellMask™) and the absence of substrates are preferable. The main conclusion of the work was the absence of a clotting reaction between coelomocytes obtained from different individuals.