Details

Предметом данной работы было исследование взаимодействия противоопухолевых соединений на основе тиенопиримидина с ферментативным центром поли(АДФ-рибоза) полимеразы-1 человека (PARP-1). Известно, что PARP-1 регулирует восстановление поврежденной ДНК, а опухолевые клетки с нарушенным механизмом репарации ДНК чувствительны к ингибированию PARP-1. Хотя в настоящее время уже одобрен ряд ингибиторов PARP-1 (PARPis) для терапии опухолей, они могут снижать ее эффективность, вырабатывая устойчивость к PARPis. В связи с этим поиск новых PARPis актуален для разработки новых подходов к терапии рака. Целью работы было исследование новых противоопухолевых соединений тиено[3,2-e]пирроло[1,2-a]пиримидина в роли потенциальных PARPis. Для этого было проведено тестирование и доказана их ингибирующей активности к PARP-1 при помощи хемилюминесцентного анализа. С помощью молекулярного докинга были определены потенциальные участки связывания ингибитора с белком. Таким образом, данные соединения могут быть использованы при разработке новых PARPis. Для дальнейшего исследования кинетики связывания белка с ингибиторами была  наработана и очищена плазмида, кодирующая рекомбинантный белок, отработаны методы экспрессии и очистки рекомбинантного PARP-1. Результаты исследования будут применены при разработке новых клинических подходов по терапии рака.

The subject of this work was the study of the interaction of antitumor compounds based on thienopyrimidine with the enzymatic center of human poly(ADP-ribose) polymerase-1 (PARP-1). PARP-1 is known to regulate the repair of damaged DNA, and tumor cells with impaired DNA repair machinery are sensitive to inhibition of PARP-1. Although a number of PARP-1 inhibitors (PARPis) have already been approved for tumor therapy, they can reduce its effectiveness by developing resistance to PARPis. In this regard, the search for new PARPis is relevant for the development of new approaches to cancer therapy. The aim of the work was to investigate the novel antitumor compounds thieno[3,2-e]pyrrolo[1,2-a]pyrimidine as potential PARPis. For this purpose, testing was carried out and their inhibitory activity to PARP-1 was proven using chemiluminescence analysis. With the help of molecular docking, potential sites of inhibitor binding to protein were identified. In this way, these compounds can be used in the development of new PARPis. For further study of the kinetics of protein binding to inhibitors, a plasmid encoding a recombinant protein was developed and purified, and methods for expression and purification of recombinant PARP-1 were developed. The results of the study will be applied in the development of new clinical approaches to cancer therapy.